阻斷γ鏈族細胞因子在心肌缺血再灌注損傷中的保護作用.pdf

1、目的：
　　 通過CP-690550阻斷γ鏈族細胞因子與JAK-STAT信號轉導通路的聯(lián)系，探求其對γ鏈族細胞因子在即時免疫中的影響及對缺血再灌注心肌明確的保護作用。
　　 方法：
　　 本研究采用大鼠心臟腹部移植術建立心肌缺血再灌注損傷模型：取出供體大鼠心臟，將供體心臟主動脈、肺動脈分別和受體大鼠腹主動脈、下腔靜脈進行端側吻合，術后供心復跳，受體大鼠存活為模型建立成功標志，受體原心臟不予任何處理。
　　

2、 實驗分為5組：對照組6只、模型組6對(心臟供體和受體為一對)、CP-690550高劑量組(20mg/kg)6對、CP-690550中劑量組(15mg/kg)6對、CP-690550低劑量組(10mg/kg)6對。成功建立大鼠心臟腹部移植模型后，各給藥組立即給予不同濃度的CP-690550灌胃，模型組及對照組給相應量生理鹽水灌胃。12h后，各組再次給藥。24h后處死動物，腹腔靜脈取血，摘取供體心臟。保存血清、心肌組織及組織勻漿進行相應指

3、標檢測。
　　 檢測方法及觀察指標：
　　 (1)酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定血清中IL-2、IL-4、IL-7、IL-15變化及相關生化法檢測心肌組織中CK、LDH、SOD、MDA的含量。
　　 (2)蘇木精-伊紅染色法(HE法)觀察心肌形態(tài)學改變。
　　 (3)免疫組織化學法(SABC法)檢測心肌組織中Bcl-2、Bax蛋白的表達。
　　 (4)原位末端轉移酶標記法(TUNEL法)檢測心肌

4、細胞凋亡。
　　 結果：
　　 1、模型組同正常組比較，血清IL-2、IL-7、IL-15表達升高(P<0.001)，IL-4則降低(P<0.001)；給藥組與模型組比較，血清IL-2、IL-7、IL-15表達降低(P<0.05)，IL-4表達升高(P<0.05)。
　　 2、模型組與正常組比較SOD(P<0.001)、CK(P<0.001)、LDH(P<0.05)活性降低，MDA的含量升高(P<0.01)：給藥

5、組與模型組比較SOD、CK、LDH活性則升高(P<0.05)，MDA的含量降低(P<0.05)。
　　 3、模型組心肌細胞腫脹、變形、部分心肌纖維橫紋不清或消失；和模型組比較，給藥組心肌細胞變性壞死的程度較輕，細胞大體形態(tài)健全。
　　 4、模型組Bax蛋白表達增多、Bcl-2蛋白基本未見表達，心肌細胞出現(xiàn)大量凋亡。和模型組比較，給藥組Bax蛋白表達較少、Bcl-2蛋白表達增多，細胞凋亡程度均較輕。
　　 結論：<

6、br>　　 1、缺血再灌注損傷發(fā)生時，促炎因子IL-2、IL-7、IL-15的含量顯著升高，抗炎因子IL-4顯著降低。γ鏈族細胞因子與損傷密切相關。阻斷JAK3-STAT信號轉導通路干擾γ鏈族細胞因子的表達，能夠保護缺血再灌注心肌。
　　 2、CP-690550可以減輕心臟移植缺血再灌注模型心肌損傷，其機制是通過：①干預γ鏈族細胞因子：降低促炎因子、升高抗炎因子；②抗氧自由基損傷：增強心肌SOD、CK、LDH的活性，降低MDA