早期食管鱗癌進(jìn)展轉(zhuǎn)移相關(guān)分子遺傳學(xué)標(biāo)志物的篩選.pdf

1、背景：食管鱗癌是我國(guó)癌癥疾患的主要病種之一，早期診斷早期治療具有重要意義。隨著腫瘤診治理念的進(jìn)步，近年對(duì)早期食管鱗癌探索實(shí)施局部粘膜切除術(shù)等新方案，達(dá)到在避免過(guò)度治療的前提下根治腫瘤的目的。新方案所面臨的關(guān)鍵問(wèn)題是能否正確選擇適應(yīng)癥。目前無(wú)論是對(duì)活檢標(biāo)本病理學(xué)檢查和其他影像學(xué)檢查均難以判斷腫瘤的進(jìn)展和轉(zhuǎn)移傾向。腫瘤進(jìn)展轉(zhuǎn)移是一個(gè)極其復(fù)雜的多基因參與、多基因調(diào)控的過(guò)程，因此從分子水平上檢測(cè)與腫瘤相關(guān)遺傳學(xué)的改變，尋找和揭示與早期食管鱗癌進(jìn)

2、展和轉(zhuǎn)移相關(guān)的分子生物學(xué)標(biāo)志物，從而提供判斷或預(yù)測(cè)腫瘤進(jìn)展轉(zhuǎn)移的分子水平依據(jù)是本項(xiàng)目研究探索的主要目標(biāo)。本研究采用微陣列比較基因組雜交（Array-based Comparative genomichybridization，Array-CGH）及TaqMan Human MicroRNA芯片技術(shù)，試圖從早期食管鱗癌組織的“DNA片段拷貝數(shù)變化譜型”及“microRNA表達(dá)譜”中篩選出有鑒別意義的擴(kuò)增（或缺失）基因/染色體區(qū)段和micr

3、oRNA，以此作為早期食管鱗癌進(jìn)展轉(zhuǎn)移潛能相關(guān)的標(biāo)志物，從而為選擇正確的治療方案提供科學(xué)依據(jù)。
　　 方法：第一部分：采用Array-CGH技術(shù)檢測(cè)24例T1NO期食管鱗癌組織中全基因組染色體DNA拷貝數(shù)改變，研究病例中11例患者術(shù)后40月內(nèi)死亡（死亡組），13例患者術(shù)后生存80月以上（生存組）。第二部分：采用TaqMan HumanMicroRNA Arrays技術(shù)分析第一部分所用兩組病例中的16例microRNA表達(dá)情況：生

4、存組和死亡組各選取前8例。通過(guò)以上技術(shù)分析早期食管鱗癌組織全基因組染色體拷貝數(shù)改變及microRNA表達(dá)與腫瘤進(jìn)展及轉(zhuǎn)移等預(yù)后關(guān)系。
　　 結(jié)果：1、兩組樣品中共有多條染色體發(fā)生變化，其中最常見(jiàn)的染色體基因組擴(kuò)增發(fā)生在1q、3q、5p、6p、7q/p、8q/p、9q、11 q、12p、14q、16p、17 q/p、18p、19 q/p、20 q/p和22q染色體區(qū)段上，在染色體3p、4q/p、5q、6p、9p、11q、13q、1

5、4q、18q、19q、21q中常見(jiàn)染色體基因組缺失。與死亡組相比較，生存組更易出現(xiàn)包括染色體1q、3q、5p、7q/p、8q/p、9q、11q、12p、14q、16p、17q、19q、20q和22q擴(kuò)增和染色體4q/p、5q和13q缺失。兩組差異性小片段DNA拷貝數(shù)改變主要為1q21.3-23.3、3q21.1-24、3q26.1-26.33、5p13.1-15.31、7p22、7q11.23、8p11.2、8q22.1-24.3、11

6、q12.1-13.5、12p12.1-13.33、14q23.1、16p12.1-13.3、17q25.1、19q13.12、20q11.21-13.33、22q12.1-13.2擴(kuò)增及4p、4q31-35、5q22.3、13q12.21-12.2缺失。進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)，109個(gè)基因及探針可將死亡組與生存組區(qū)分開(kāi)來(lái)（p<0.01）。2、兩組樣品中多個(gè)microRNA表達(dá)發(fā)生改變，經(jīng)過(guò)組間對(duì)比，其中四個(gè)microRNA表達(dá)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p

7、<0.05），包括：miR-574-3p、miR-19b、miR-31及miR-28-3p。
　　 結(jié)論：在早期食管鱗癌顯著不同生存期患者的染色體DNA拷貝數(shù)變化及microRNA表達(dá)變化中，存在特定的染色體區(qū)段或基因及microRNA，可能決定腫瘤進(jìn)展轉(zhuǎn)移潛能。所篩選出的基因組DNA拷貝數(shù)改變及相關(guān)基因和microRNA有可能成為早期食管鱗癌預(yù)測(cè)進(jìn)展轉(zhuǎn)移和預(yù)后的分子標(biāo)志物，從而為早期食管鱗癌患者選擇正確的治療方案提供科學(xué)依據(jù)。