高蓄能作物油葵的染色體核型分析及遺傳轉化.pdf

1、葵花籽富含各種不飽和油，這些油不僅可以作為食用油，而且可以做成生物柴油?，F(xiàn)在日本，泰國已經(jīng)開始研制利用葵花籽油作為生物能源，并投入使用。本實驗在細胞學和轉基因方面，對向日葵進行了以下幾方面的研究。 通過0.05％秋水仙素水溶液、對二氯苯飽和水溶液、0.002 mol/L8-羥基喹啉水溶液、4℃水溶液四種不同的溶液，處理8種向日葵根尖細胞。觀察向日葵根尖細胞有絲分裂及核型分析。結果表明：四種處理方法中，低溫處理能有效地增加中期分裂

2、相，秋水仙素次之，對二氯苯對紡錘體的抑制作用不夠強，8-羥基喹啉的效果最差。對向日葵的細胞學觀察說明，8種基因型的核型圖像勻稱，略呈梯度遞減。 FPS是倍半萜合成中的一個關鍵酶，可以提高植物的油含量，PSY、lycB是類胡蘿卜素生物合成途徑中的關鍵酶，可以提高作物的含油品質，利用農桿菌介導向日葵的遺傳轉化。本實驗以向日葵種子為外植體，建立了向日葵的遺傳受體體系，轉化了PSY、lycB，F(xiàn)PS三種基因。經(jīng)PCR和PCR-South

3、ern分析證明PSY被轉入向日葵中。并對影響遺傳轉化的因子進行了研究。 結果表明：利用根癌農桿菌對向日葵F53、F51進行轉化，侵染濃度OD6oo=1，切子葉侵染前干燥4小時，侵染時間6分鐘，預培養(yǎng)和共培養(yǎng)各2天，潮霉素適宜篩選濃度2～5mg/L，卡那霉素適宜篩選濃度20～40mg/L。植物激素與篩選劑相對應，當用潮霉素篩選時用1mg/L，的IBA，當用卡那霉素篩選時用1mg/L的NAA。潮霉素的篩選效果要好于卡那霉素。最后得到