熒光原位雜交技術(shù)體系的建立及其在檢測(cè)8號(hào)染色體數(shù)目異常及bcr-abl融合基因中的應(yīng)用.pdf

1、山西醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文熒光原位雜交技術(shù)體系的建立及其在檢測(cè)8號(hào)染色體數(shù)目異常及bcrabl融合基因中的應(yīng)用姓名：王慧萍申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專(zhuān)業(yè)：內(nèi)科血液學(xué)指導(dǎo)教師：?jiǎn)陶袢A王宏偉20040508山西醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文第一部分聯(lián)合應(yīng)用細(xì)胞遺傳學(xué)、巢式RTPCR和FIsH技術(shù)檢測(cè)慢性髓系白血病患者的腫瘤負(fù)荷摘要目的探討常規(guī)細(xì)胞遺傳學(xué)(conventionalcytogeneties，CC)、巢式逆轉(zhuǎn)錄一聚合酶鏈反應(yīng)(nested—rever

2、setranscriptasepolymerasechainreaction，nested—RT—PCR)及雙色雙融合熒光原位雜交(dual—coloranddual—fusionfluorescenceinsituhybridization，D—FISH)三種技術(shù)監(jiān)測(cè)慢性髓性白血病(chroniCmyeloidleukemia，CML)患者治療過(guò)程中腫瘤負(fù)荷的靈敏度和特異性。方j(luò)法聯(lián)合應(yīng)用cc、巢式RT—PCR和DFISH三種技術(shù)對(duì)1

3、2例治療中CML患者的腫瘤負(fù)荷水平進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果對(duì)5例INF—a治療的CML患者治療前后的24份骨髓標(biāo)本檢測(cè)顯示，23份標(biāo)本檢出不同比率的Ph染色體，所有標(biāo)本RT～PCR檢測(cè)結(jié)果均為陽(yáng)性。1份Ph(一)bcr／abl()標(biāo)本(取自病例2INF—a。治療后75個(gè)月)經(jīng)FISH檢測(cè)發(fā)現(xiàn)仍有45％的bcr／abl()細(xì)胞；對(duì)三組經(jīng)cc檢測(cè)Ph染色體陽(yáng)性率相同的標(biāo)本(分別取自病例l治療后22個(gè)月、26個(gè)月，病例5治療后12個(gè)月、16個(gè)月及病例4

4、治療后6個(gè)月、10個(gè)月)，進(jìn)一步行FISH檢測(cè)，分別檢出475％和395％、740％和605％、99o％和995％的bcr／abl()細(xì)胞。對(duì)7例非清髓性異基因造血干細(xì)胞移植治療的CML患者治療前后的40份骨髓標(biāo)本檢測(cè)顯示，29份標(biāo)本檢出不同比率的Ph染色體，3份因細(xì)胞數(shù)少CC分析失敗。36份標(biāo)本RT—PCR檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性，4份標(biāo)本(取自病例6移植后12個(gè)月、18個(gè)月、26個(gè)月、38個(gè)月)Ph染色體及RT—PCR結(jié)果均為陰性。4份Ph(

5、～)bcr／abl()標(biāo)本(分別取自病例6移植后9個(gè)月、10個(gè)月、病例7移植后15個(gè)月及病例8移植后12個(gè)月)，經(jīng)FISH檢測(cè)分別檢出54％、O％、165％及15％的bcr／abl()細(xì)胞。3份因細(xì)胞數(shù)少Cc核型分析失敗的標(biāo)本(取自病例10移植后20天、60天、病例12移植后40天)，經(jīng)FISH檢測(cè)bcr／abl()細(xì)胞檢出率分別為550％、275％和735％。1份Ph(一)bcr／abl(一)標(biāo)本(取自病例6移植后12個(gè)月)FISH檢