木聚糖酶產(chǎn)生菌的培養(yǎng)條件優(yōu)化及部分酶學性質(zhì)研究.pdf

1、對本實驗室保藏的綠色木霉(Trichoderma viride)菌株。進行液態(tài)發(fā)酵，并對產(chǎn)酶發(fā)酵條件作了優(yōu)化。優(yōu)化的液態(tài)發(fā)酵條件如下：以10％玉米芯粉為碳源，0.5％的蛋白胨為氮源，100mL三角瓶20％裝液量，2％接種量，培養(yǎng)基初始pH為4.0，30℃，180rpm條件下培養(yǎng)72h。 將在此條件下培養(yǎng)得到的發(fā)酵液離心，加入50％飽和度的(NH<,4>)<,2>SO<,4>鹽析，得到粗酶液。經(jīng)測定，酶活為449U/mL，比活18

2、4.9U/mg。對此酶液進行部分基本酶學性質(zhì)研究。測得該酶的最適反應溫度為60℃；最適pH為4.0；有一定的熱穩(wěn)定性，40℃下能較長時間地保持較高活性，當高于40℃時，酶活迅速下降，作用20min后，相對酶活僅為4.5％；此酶在酸性環(huán)境下有較強的穩(wěn)定性，但隨著pH值的上升，酶的穩(wěn)定性迅速下降，當pH值達到6.0時幾乎檢測不到酶活?？疾炝瞬糠纸饘匐x子對該酶酶活的影響：當加入較低濃度金屬離子時，Cu<'2+>對木聚糖酶有較強的抑制作用，其抑

3、制率達到了41％。Al<'3+>次之，此外Co<'2+>、Cr<'3+>在此濃度對酶也有不同程度的抑制作用。隨著金屬離子濃度的增加，先前起抑制作用的金屬離子對酶活力的抑制減弱，其中Cu<'2+>對木聚糖酶的抑制率從41％降低到8％。Al<'3+>、Co<'2+>、Cr<'3+>對木聚糖酶的抑制率也有不同程度的降低。其它金屬離子K<'+>、Ba<'2+>、Ca<'2+>、Mn<'2+>、Fe<'3+>、Mg<'2+>等對酶活力無明顯影響。