IL-17誘導(dǎo)哮喘急性發(fā)作期患者外周血CD4+T細(xì)胞分泌IL-8.pdf

1、研究目的支氣管哮喘(哮喘)是慢性持續(xù)性氣道炎癥疾病,多種炎性細(xì)胞和炎性介質(zhì)參與其過(guò)程。目前普遍認(rèn)為輔助性T淋巴細(xì)胞(CD4~+T細(xì)胞)兩種亞型Th1、Th2的失衡是哮喘發(fā)病的重要機(jī)制。近年來(lái)發(fā)現(xiàn)了一類新的CD4~+T細(xì)胞亞群,即Th17細(xì)胞,在哮喘的發(fā)生發(fā)展中起著重要的作用。Th17細(xì)胞重要的效應(yīng)因子是IL-17。IL-8是中性粒細(xì)胞趨化、聚集和活化的重要細(xì)胞因子。研究發(fā)現(xiàn)哮喘急性發(fā)作患者痰液及外周血中IL-17、IL-8均明顯高于緩解

2、期及健康人;用IL-17刺激體外培養(yǎng)的人支氣管上皮細(xì)胞可以引起IL-8的產(chǎn)生,誘導(dǎo)中性粒細(xì)胞在氣道中的聚集,從而使哮喘病情加重甚至惡化;哮喘患者外周血中CD4~+T細(xì)胞IL-8表達(dá)水平明顯高于正常人;CD4~+T細(xì)胞亞群中IL-17是Th17細(xì)胞特異分泌的,因此,我們假設(shè)IL-17促進(jìn)CD4~+T細(xì)胞分泌IL-8,可能是Th17細(xì)胞參與哮喘發(fā)病機(jī)制之一。
　　方法：收集健康人,哮喘急性發(fā)作期輕、中度病人各4例,三組患者性別、年齡比

3、較無(wú)顯著性差異,具有可比性。各取外周血60ml,免疫磁珠分離、純化外周血CD4~+T細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞純度,臺(tái)盼藍(lán)拒染色法測(cè)細(xì)胞活力,然后哮喘急性發(fā)作期患者外周血CD4~+T細(xì)胞分成四組進(jìn)行培養(yǎng),分別加入重組hIL-17(A組),重組hIL-17+anti-hIL-17Ab(B組),hIL-17+hIgG(C組)及原液培養(yǎng)(D組);健康對(duì)照組進(jìn)行原液培養(yǎng)(E組)。培養(yǎng)36h時(shí),用ELISA法測(cè)定培養(yǎng)上清液中IL-8的濃度。

4、　　結(jié)果：1.哮喘急性發(fā)作期患者外周血CD4~+T細(xì)胞原液培養(yǎng)上清液的IL-8濃度(D組)高于健康原液組(E組)(均P<0.05),哮喘急性發(fā)作期中度患者外周血CD4~+T淋巴細(xì)胞培養(yǎng)上清液的IL-8濃度較哮喘急性發(fā)作輕度患者組明顯增加,且與病情嚴(yán)重程度呈正相關(guān)(r=0.764,P=0.02α=0.05);2.哮喘急性發(fā)作期患者的外周血CD4~+T細(xì)胞培養(yǎng)后上清液中的IL-8濃度變化為:A組、C組>D組>B組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。(均P<