Fascin蛋白和E-鈣粘蛋白在口腔鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)及意義.pdf

1、目的：口腔鱗狀細(xì)胞癌(oral squamous cell carcinomas OSCC)是口腔頜面部最常見(jiàn)的惡性腫瘤，其發(fā)病率較高。根據(jù)癌細(xì)胞的分化程度可分為高、中、低分化鱗狀細(xì)胞癌，它們均具有侵襲和轉(zhuǎn)移的特性。目前認(rèn)為腫瘤是一種多基因性疾病，是一個(gè)多基因變異不斷累積的結(jié)果。已有研究表明，口腔鱗狀細(xì)胞癌的發(fā)生、發(fā)展、侵襲轉(zhuǎn)移也涉及到癌基因激活及抑癌基因失活等多基因的變異。
　　 Fascin蛋白又稱為聚束蛋白，是一種肌動(dòng)蛋白

2、結(jié)合蛋白，參與細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)和黏附功能。它與F-肌動(dòng)蛋白結(jié)合后的結(jié)構(gòu)加強(qiáng)了肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架，對(duì)細(xì)胞移動(dòng)起著重要作用。研究發(fā)現(xiàn)Fascin蛋白的增加可引起腫瘤細(xì)胞膜表面突起增多，增殖旺盛，影響細(xì)胞粘附能力的改變，改變細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)的黏附能力，增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)能力，以及通過(guò)細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路等途徑增強(qiáng)腫瘤組織的局部侵襲轉(zhuǎn)移能力，F(xiàn)ascin蛋白在多種腫瘤組織和癌前病變組織中呈現(xiàn)上調(diào)表達(dá)。
　　 E-鈣粘蛋白(E-cadhernin，E

3、-cad)編碼基因定位于16號(hào)染色體q22.1附近，是介導(dǎo)上皮細(xì)胞間粘連的一種細(xì)胞粘附分子，對(duì)Ca2+有高度敏感性。在生理?xiàng)l件下E-cad對(duì)維持組織結(jié)構(gòu)形態(tài)、調(diào)節(jié)細(xì)胞運(yùn)動(dòng)、及參與維持細(xì)胞之間、細(xì)胞與基質(zhì)之間的黏附力都具有重要作用。目前研究認(rèn)為E-cad是一種抑癌基因，當(dāng)其在腫瘤組織中活性正常時(shí)，腫瘤細(xì)胞不易從原發(fā)灶上脫落，E-cad通過(guò)加強(qiáng)細(xì)胞間的黏附力及抑制細(xì)胞增殖來(lái)發(fā)揮抑癌功能；而其活性降低或失活時(shí)則導(dǎo)致細(xì)胞黏附功能下降從而促進(jìn)腫瘤

4、細(xì)胞轉(zhuǎn)移。研究表明E-cad的表達(dá)下降與腫瘤的分化程度、發(fā)展、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的發(fā)生及預(yù)后密切相關(guān)。
　　 近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)，很多人類腫瘤出現(xiàn)Fascin蛋白和E-鈣粘蛋白的異常表達(dá)，并且與腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移以及患者的預(yù)后密切相關(guān)。本研究通過(guò)免疫組化的方法檢測(cè)二者在口腔鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)及與口腔鱗狀細(xì)胞癌組織學(xué)分級(jí)的關(guān)系，為口腔鱗狀細(xì)胞癌的預(yù)后判斷及臨床治療提供依據(jù)，并進(jìn)一步探討二者作為判斷患者預(yù)后標(biāo)記物和治療靶點(diǎn)的前景。
　　 方

5、法：本試驗(yàn)選取存檔的60例口腔鱗狀細(xì)胞癌標(biāo)本蠟塊和40例口腔正常粘膜組織蠟塊，分為試驗(yàn)組(OSCC組)和對(duì)照組(NM組)?？谇击[狀細(xì)胞癌標(biāo)本均進(jìn)行HE染色后經(jīng)有經(jīng)驗(yàn)的病理醫(yī)師閱片后確診，其中高分化鱗癌31例，中分化鱗癌21例，低分化鱗癌8例。將每個(gè)蠟塊切為4-5μm的切片，共切4張，1張HE染色，1張F(tuán)ascin蛋白染色，1張E-鈣粘蛋白染色，1張作為陰性對(duì)照。用已知的Fascin蛋白陽(yáng)性的胃癌標(biāo)本和已知的E-鈣粘蛋白陽(yáng)性正常腸粘膜標(biāo)本

6、作為陽(yáng)性對(duì)照，以PBS代替-抗作為陰性對(duì)照，運(yùn)用SP免疫組織化學(xué)法進(jìn)行試驗(yàn)。
　　 Fascin蛋白染色判定參照Hashimoto的標(biāo)準(zhǔn)，以細(xì)胞膜和細(xì)胞漿顯示彌漫性棕黃色顆粒為陽(yáng)性染色，每張切片隨機(jī)計(jì)數(shù)10個(gè)高倍視野，每個(gè)視野計(jì)數(shù)100個(gè)細(xì)胞。據(jù)陽(yáng)性細(xì)胞百分率判定：(1)未見(jiàn)棕黃色顆粒為陰性；(2)<25％為弱陽(yáng)性(+)；(3)25％-75％為陽(yáng)性(++)；(4)>75％為強(qiáng)陽(yáng)性(+++)。
　　 E-鈣粘蛋白以細(xì)胞膜上

7、出現(xiàn)棕黃色膜性染色作為正常表達(dá)的陽(yáng)性標(biāo)記。而位于細(xì)胞漿中或胞膜與胞漿共同有連續(xù)線狀或斑點(diǎn)狀黃色至棕黃色顆粒沉積者為異常陽(yáng)性表達(dá)，無(wú)染色者為陰性表達(dá)。每張切片隨機(jī)計(jì)數(shù)10個(gè)高倍視野，每個(gè)視野計(jì)數(shù)100個(gè)細(xì)胞。據(jù)陽(yáng)性細(xì)胞百分率判定：(1)陰性：無(wú)染色，陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)<25％；(2)弱陽(yáng)性：胞漿染色淺，陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)26％～50％；(3)中度陽(yáng)性：胞膜胞漿混合染色，陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)51％-75％；(4)強(qiáng)陽(yáng)性：胞膜連線狀均勻染色，陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)>75％。

8、>　　 采用SPSS17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，試驗(yàn)結(jié)果采用x2檢驗(yàn)，P<0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)果：1.Fascin蛋白的表達(dá)：對(duì)照組中，40例正?？谇徽衬?biāo)本均呈陰性表達(dá)，試驗(yàn)組中，60例口腔鱗狀細(xì)胞癌標(biāo)本共41例呈現(xiàn)陽(yáng)性表達(dá)，陽(yáng)性率為68.33％，陽(yáng)性率顯著高于對(duì)照組。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析x2值為46.33，P<0.01，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 2.E-鈣粘蛋白的表達(dá)：對(duì)照組中，40例正?？谇徽衬?biāo)本有38例呈強(qiáng)陽(yáng)

9、性表達(dá)，2例呈異常陽(yáng)性，異常陽(yáng)性率為5％，試驗(yàn)組中，60例口腔鱗狀細(xì)胞癌標(biāo)本有21例呈強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)，39例呈現(xiàn)異常陽(yáng)性表達(dá)，異常陽(yáng)性率為65％顯著高于對(duì)照組。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析x2值為35.72，P<0.01，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 3.Fascin蛋白和E-鈣粘蛋白的表達(dá)與臨床病理指標(biāo)的關(guān)系：二者的表達(dá)均與鱗癌的組織學(xué)分級(jí)具有相關(guān)性，鱗癌的分化越低，F(xiàn)ascin蛋白的陽(yáng)性表達(dá)和E-鈣粘蛋白的異常陽(yáng)性率表達(dá)越高P<0.05，而與患者性別、

10、年齡無(wú)顯著相關(guān)性P>0.05。
　　 結(jié)論：1.在口腔鱗狀細(xì)胞癌標(biāo)本中Fascin蛋白表達(dá)陽(yáng)性率顯著高于在正常粘膜中的表達(dá)，且與口腔鱗狀細(xì)胞癌的病理分級(jí)相關(guān)。提示Fascin蛋白可能在口腔鱗狀細(xì)胞癌的進(jìn)展、轉(zhuǎn)移過(guò)程中發(fā)揮一定的作用。
　　 2.在口腔鱗狀細(xì)胞癌標(biāo)本中E-鈣粘蛋白的膜性表達(dá)陽(yáng)性表率明顯低于正常粘膜中的表達(dá)，且與口腔鱗狀細(xì)胞癌的病理分級(jí)相關(guān)。提示E-cad在口腔鱗狀細(xì)胞癌的進(jìn)展、轉(zhuǎn)移過(guò)程中可能發(fā)揮著重要的作用