以不同羊膜為載體的人角膜緣干細(xì)胞原代培養(yǎng)研究.pdf

1、目的：觀察在完整羊膜與去上皮羊膜兩種不同載體上所培養(yǎng)的人角膜緣干細(xì)胞的生長(zhǎng)特點(diǎn)及P63的表達(dá)情況。
　　方法：采用組織塊培養(yǎng)法體外擴(kuò)增培養(yǎng)人角膜緣干細(xì)胞，將來(lái)自同一供體的2塊角膜緣組織隨機(jī)種植于完整上皮羊膜（A組）和去上皮羊膜（B組）上培養(yǎng)。倒置顯微鏡下觀察培養(yǎng)細(xì)胞體外生長(zhǎng)的形態(tài)及特點(diǎn)，并運(yùn)用免疫細(xì)胞化學(xué)方法觀察所培養(yǎng)的細(xì)胞P63抗體的表達(dá)情況。
　　結(jié)果：A、B兩組細(xì)胞（每組10例）分別培養(yǎng)成功8例。兩組培養(yǎng)成功的8例細(xì)胞

2、均能在體外移行、擴(kuò)增、連接成片。B組移行擴(kuò)增的速度較A組快。兩組細(xì)胞生長(zhǎng)至14天時(shí)做免疫細(xì)胞化學(xué)染色，共16孔細(xì)胞中均可見(jiàn)P63陽(yáng)性細(xì)胞，其中A組細(xì)胞P63陽(yáng)性率高于B組細(xì)胞（P＜0.05）。
　　結(jié)論：1.角膜緣干細(xì)胞在完整羊膜和去上皮羊膜上均能體外擴(kuò)增，組織塊培養(yǎng)法成功率較高。2.以去上皮羊膜為載體的角膜緣干細(xì)胞增殖分化快，體外擴(kuò)增14天后原始細(xì)胞數(shù)量較少；以完整羊膜為載體的角膜緣干細(xì)胞生長(zhǎng)周期長(zhǎng)、體外擴(kuò)增14天后原始細(xì)胞數(shù)量