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1、腫瘤是嚴(yán)重威脅人類健康疾病之一。腫瘤標(biāo)志物在腫瘤的臨床診斷中是不可或缺的。近幾年來,在腫瘤細(xì)胞及其標(biāo)志物的診斷領(lǐng)域出現(xiàn)了多種分析方法及檢測(cè)傳感器。為了研制便攜檢測(cè)儀器,世界范圍內(nèi)的科研工作者們?cè)诖朔矫孀隽舜罅抗ぷ?。雖然這些方法有很多優(yōu)點(diǎn),但開發(fā)新型的、選擇性和靈敏度較高的臨床分析方法以滿足現(xiàn)代醫(yī)療診斷和生物醫(yī)學(xué)研究的需求仍是一項(xiàng)極具挑戰(zhàn)性的工作。
本文研制了一種基于CdS和PbS兩種量子點(diǎn)的新型的電化學(xué)生物傳感器,其中還包
2、含了磁珠和聚苯乙烯微球以及適體DNA的使用,并且將此種傳感器應(yīng)用在了MCF-7腫瘤細(xì)胞及其標(biāo)志物的分析檢測(cè)當(dāng)中。另外,芯片毛細(xì)管電泳是一種新型的微型全分析系統(tǒng),它具有分離效率高、分析速度快、試劑消耗少等優(yōu)點(diǎn)。電化學(xué)檢測(cè)以其檢出限低、線性范圍寬、選擇性好、設(shè)備簡(jiǎn)單、價(jià)格低廉而得到廣泛的應(yīng)用。在這篇文章中提出了一個(gè)快速高效分離低分子量DNA片段的方法。本論文的主要內(nèi)容包括:
利用連接DNA作為穩(wěn)定劑合成了CdS和PbS納米粒子
3、,DNA的一端含巰基參加合成反應(yīng),另一端含有氨基,適體的氨基端與表面帶有羧基的磁珠或是聚苯乙烯微球反應(yīng),通過控制兩種DNA的比例,大量的連接DNA和少量的適體接到表面帶有羧基的磁珠或是聚苯乙烯微球表面以分別獲得帶有磁性的MUCl納米探針和非磁性的HER-3納米探針。在磁性MUCl納米探針上的與金電極上的捕獲DNA雜交適體,在靶細(xì)胞存在的條件下與細(xì)胞表面的MUCl結(jié)合。磁性分離后,靶細(xì)胞被轉(zhuǎn)移到另外一種含有非磁性的HER-3納米探針的溶液
4、中并確保細(xì)胞表面的HER-3可以通過適體和蛋白的親和性完全的跟納米探針結(jié)合。然后,用HN03溶液溶解CdS和PbS納米粒子,得以通過陽極溶出伏安法(ASV)進(jìn)一步檢測(cè)Cd2+和Pb2+。然后,目標(biāo)細(xì)胞的數(shù)量和靶細(xì)胞表面的MUCl和HER-3量可以通過Cd2+和Pb2+的信號(hào)推算得到。由于一個(gè)磁珠或是聚苯乙烯微球可以與數(shù)千個(gè)CdS和PbS納米粒子結(jié)合,因此,信號(hào)就得以顯著的提高。
在芯片毛細(xì)管電泳中將金膠作為標(biāo)記與酶增強(qiáng)電化
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