新型高效的DNA生物傳感器的制備與應(yīng)用研究.pdf

1、華東師范大學(xué)碩士學(xué)位論文新型高效的DNA生物傳感器的制備與應(yīng)用研究姓名：趙潔申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專(zhuān)業(yè)：分析化學(xué)指導(dǎo)教師：方禹之何品剛20050501摘要第一章：緒論首先系統(tǒng)介紹了DNA序列測(cè)定的研究進(jìn)展。介紹了DNA生物傳感器的原理(包括DNA生物傳感器的分予以別原理及DNA在固體基質(zhì)表面的固定化)和分類(lèi)，并總結(jié)了DNA生物傳感器的特點(diǎn)和發(fā)展新動(dòng)向。接著介紹了磁性納米顆粒及其在基因分離檢測(cè)中的應(yīng)用，和熒光探針及應(yīng)用。最后闡述了本論文的目的

2、和意義。第二章柔紅霉素識(shí)別基于磁性納米顆粒的DNA電化學(xué)生物傳感器的研究本文將納米技術(shù)、核酸分子雜交技術(shù)與電化學(xué)分析技術(shù)相結(jié)合，研制了具有高靈敏度和高選擇性的基于磁’陛納米顆粒的電化學(xué)I)NA生物傳感器。用人工合成的5’端氨基修飾的寡聚核苷酸片段與磁性納米顆粒連接，即制備成DNA探針。探針上的寡聚核昔酸片段與不同序列的寡聚核苷酸片段雜交后，用聚吡咯摻雜碳納米管修飾電極(MWNTCOOT／ppyCME)對(duì)嵌入式雜交指示劑柔紅霉素進(jìn)行電化學(xué)

3、檢測(cè)通過(guò)雜交前后電化學(xué)信號(hào)的變化可實(shí)現(xiàn)對(duì)靶寡聚核苷酸序列的檢測(cè)。以上所述的DNA探針，與非互補(bǔ)序列的寡聚核苷酸片段雜交后，柔紅霉素的信號(hào)幾乎與空白探針的柔紅霉素信號(hào)一致，而一個(gè)堿基錯(cuò)配，兩個(gè)堿基錯(cuò)配，三個(gè)堿基錯(cuò)配的靶序列與完全互補(bǔ)的靶序列所得的信號(hào)可明顯地區(qū)分丌。說(shuō)明此種方法可實(shí)現(xiàn)DNA片段中突變點(diǎn)的檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)所得線性方程為ip(pA)=o8255—00847cDNAxl0B，線性范圍為69x10。14～86xlff|3mol／L，相關(guān)

4、系數(shù)為09974，最低檢出限為2310Ⅲmol／L。第三章亞甲基藍(lán)識(shí)別基于磁性高分子微球的DNA電化學(xué)生物傳感器的研究磁性高分子微球是一種具有親和性的固相載體，其粒徑小，具有超順磁性，表面積大。本文利用Fe2、Fe3在NH40H溶液l扣共沉淀法制備納米磁性粒子，并采用分散聚合法，制成表面含豐富的活性基團(tuán)COOH的磁性高分子微球在偶聯(lián)活化劑EDAC作用下，51端修飾胺基的寡聚核苷酸片段共價(jià)固定到的磁性高分子微球上，即制備成DNA探針。探針