米根霉葡萄糖淀粉酶特性及其對發(fā)酵生產(chǎn)L-乳酸的影響研究.pdf

1、 葡萄糖淀粉酶是米根霉在淀粉質(zhì)培養(yǎng)基中誘導分泌的一類胞外酶，其酶活力的大小對米根霉轉(zhuǎn)化淀粉生成L-乳酸的效率以及L-乳酸發(fā)酵的周期有很大影響。本文對高產(chǎn)L-乳酸菌株米根霉As3.819葡萄糖淀粉酶進行分離純化，研究其酶學性質(zhì)，通過改變米根霉發(fā)酵生產(chǎn)L-乳酸體系中碳源、氮源、金屬離子、溫度、轉(zhuǎn)速等發(fā)酵條件，對L-乳酸的轉(zhuǎn)化率、體系中淀粉酶活力、還原糖等指標進行系統(tǒng)考察，并利用SAS軟件進行響應面回歸分析，主要結(jié)論如下：

2、經(jīng)硫酸銨鹽析，透析脫鹽，SephadexG-100柱層析等純化步驟，葡萄糖淀粉酶比活力提高23.58倍。SDS-PAGE顯示純化后的酶為一條帶，相對分子量約75.5kD。該酶以可溶性淀粉為底物時最適催化反應pH值為4.0-6.0，最適催化反應溫度為40-50℃，在50℃下保持穩(wěn)定。鈣離子和鎂離子對該酶活力有一定的增強作用，而鉛離子和亞鐵離子對其活力有明顯的抑制作用。對主要發(fā)酵參數(shù)的影響結(jié)果，運用SAS8.0軟件進行響應面回歸分析表明：Z

3、nSO4、KH2PO4、MgSO4和取樣時間四個因素中ZnSO4和KH2PO4對米根霉分泌葡萄糖淀粉酶的影響極顯著；在溫度、轉(zhuǎn)速以及裝液量三個因素中，溫度和裝液量的交互作用極顯著。優(yōu)化得到的發(fā)酵培養(yǎng)基條件為：甘薯淀粉10﹪、(NH4)2SO40.4﹪、KH2PO40.043﹪、ZnSO40.024﹪、MgSO40.024﹪，最適操作條件為：溫度30℃、轉(zhuǎn)速為198r/min、裝液量49mL/250mL左右。在此條件下可獲得較高的乳酸轉(zhuǎn)化