低產(chǎn)尿素黃酒酵母的選育及黃酒發(fā)酵工藝研究.pdf

1、建立了高效液相色譜法(HPLC)測(cè)定黃酒中微量尿素的方法，對(duì)高效液相色譜法與傳統(tǒng)尿素檢測(cè)方法二乙酰肟法和對(duì)二甲氨基苯甲醛(PDAB)法進(jìn)行了比較。 以黃酒酵母HJ1615為出發(fā)菌株，采用物理和化學(xué)連續(xù)誘變的方法，選育低產(chǎn)尿素突變菌株同時(shí)對(duì)黃酒的發(fā)酵工藝進(jìn)行了研究。 結(jié)果如下： 采用HPLC測(cè)定黃酒中微量尿素的方法：采用PinnacleIIAmino色譜柱，使用全波長(zhǎng)二極管陣列檢測(cè)器在203nm下進(jìn)行出峰掃描，以乙

2、腈和水的混合相95:5(V:V)作為流動(dòng)相，在柱溫為40℃時(shí)，流速為1mL/min進(jìn)行尿素測(cè)定。 通過對(duì)HPLC法與二乙酰肟法和PDAB法的比較，結(jié)果表明：HPLC法尿素的最低檢出限降至2mg/L，方法的檢測(cè)范圍擴(kuò)大至100mg/L，回收率在81.31-90.60％之間，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差4.05％，同時(shí)方法的重復(fù)性和穩(wěn)定性都高于傳統(tǒng)方法，而且操作簡(jiǎn)單快速，適用較廣。 使用He-Ne激光和亞硝基胍(NTG)對(duì)出發(fā)菌株HJ161

3、5進(jìn)行多輪誘變，對(duì)菌株采用了半理化的篩選方法：以含有刀豆氨酸、精氨酸和鳥氨酸的培養(yǎng)基為篩子進(jìn)行目的菌株篩選，得到低產(chǎn)尿素黃酒酵母突變株。該菌株在酒精度、總酸、氨基態(tài)氮、風(fēng)味物質(zhì)等關(guān)鍵參數(shù)上保持了親株的優(yōu)良特性，同時(shí)產(chǎn)生的尿素比親株低50％以上。 研究發(fā)酵過程中的發(fā)酵溫度，接種量以及添加無機(jī)鹽的種類和濃度對(duì)尿素生成的影響。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，提高發(fā)酵溫度和菌種接種量可以加速尿素的產(chǎn)生，但對(duì)發(fā)酵完成后尿素的總量沒有顯著性影響。添加無機(jī)鹽是降低