大鼠心肺復(fù)蘇后心腦損傷及參附注射液的干預(yù)作用.pdf

1、本文采用大鼠窒息型心臟驟停模型,觀察大鼠心肺復(fù)蘇后不同時(shí)間腦組織含水量,血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌鈣蛋白I(cTnI)、S100β蛋白、神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)的濃度,海馬VAl區(qū)和皮層S100 β蛋白、RSE的表達(dá),心肌和大腦組織病理改變,并用參附注射液進(jìn)行干預(yù),研究大鼠心肺復(fù)蘇(CPR)后心腦的損傷情況及參附注射液對(duì)心腦的保護(hù)作用. 方法： 成年雄性Sprague-Dauley(SD)大鼠160只,隨

2、機(jī)分為對(duì)照組、復(fù)蘇組、小劑量參附組(10m1/kg)和大劑量參附組(20m1/kg),再分別按氣管切開(kāi)后(對(duì)照組)或自主循環(huán)恢復(fù)(ROSC)后(其余各組)0.5h、3h、6h、12h和24h分為5個(gè)亞組,每個(gè)亞組8只.建立窒息型大鼠心肺復(fù)蘇模型,各組分別于各時(shí)間點(diǎn)取樣,以干濕比重法測(cè)定腦組織含水量;應(yīng)用免疫抑制法測(cè)定血清CK-MB含量,Access免疫化學(xué)發(fā)光分析儀以及其配套試劑定量測(cè)定血清cTnI含量;采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸收分析法

3、(ELISA)測(cè)定血清S一100 β蛋白、NSE的水平;免疫組化方法測(cè)定海馬CAl區(qū)和皮層s100 β蛋白、NSE表達(dá)情況;光鏡和電鏡下觀察心肌和大腦組織的病理改變. 結(jié)果： 1、心肺復(fù)蘇后0.5h血清CK-MB、cTnI濃度就增高(P<0.01),分別于12h、24h達(dá)高峰,光鏡和電鏡下示心肌結(jié)構(gòu)損害嚴(yán)重,肌纖維排列紊亂和部分溶解壞死.血清CK-MB濃度大、小劑量參附組從復(fù)蘇后3h起均較復(fù)蘇組顯著降低(P<0.05或P

4、<0.01),cTnI濃度小劑量參附組從復(fù)蘇后6h起較復(fù)蘇組降低(P<0.05),大劑量參附組從復(fù)蘇后3h起較復(fù)蘇組明顯降低(P<0.01),大劑量參附組在復(fù)蘇后3h、6h及12h血清cTnI含量顯著低于小劑量組(P<0.05或P<0.01).光鏡和電鏡下示肌纖維排列尚規(guī)則和輕度水腫,未見(jiàn)明顯壞死. 2、心肺復(fù)蘇后0.5h腦水含量、血清S100 β蛋白、NSE濃度就增高(P<0.05或P<0.01),并且持續(xù)升高,分別于6h、1

5、2h、24h達(dá)高峰,光鏡和電鏡下示神經(jīng)細(xì)胞固縮,毛細(xì)血管周圍水腫明顯.腦水含量大、小劑量參附組從復(fù)蘇后3h起均較復(fù)蘇組降低(P<0.05或P<0.01).血清S100 β蛋白濃度大、小劑量參附組從復(fù)蘇后6h起較復(fù)蘇組均顯著降低(p<0.05或p<0.01),血清NSE含量小劑量參附組復(fù)蘇后6h、12h較復(fù)蘇組顯著降低(P<0.05),大劑量參附組復(fù)蘇后6h、12h、24h血清NSE含量較復(fù)蘇組顯著降低(P<0.01).血清S100 β蛋

6、白、NSE含量大、小劑量參附組間均無(wú)明顯差異(P>0.05),但與復(fù)蘇組比較,大劑參附組降低血清S100β蛋白、NSE濃度的作用較小劑量組更強(qiáng)和持續(xù)時(shí)間更久.光鏡和電鏡下示大、小劑量參附組神經(jīng)細(xì)胞無(wú)明顯結(jié)構(gòu)改變,毛細(xì)血管周圍輕度水腫. 3、心肺復(fù)蘇后0.5h海馬CAl區(qū)、3h皮層S100β蛋白表達(dá)就增加(P<0.01),分別于6h、12h達(dá)高峰:海馬CAl區(qū)S100β蛋白陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)同腦水含量呈正直線相關(guān)(Pearson列聯(lián)系數(shù)r

7、=0.944,P=0.016);大、小劑量參附組皮層S100β蛋白表達(dá),從復(fù)蘇后3h較復(fù)蘇組降低(p<0.05或D<0.01),海馬CAl區(qū)S100β蛋白表達(dá)從復(fù)蘇后6h起較復(fù)蘇組顯著降低(p<0.05或p(0.01).海馬Ch1區(qū)、皮層NSE表達(dá)均從復(fù)蘇后0.5h就增加(p<0.01),分別于24h、6h達(dá)高峰(p<0.01).海馬CAl區(qū)NSE表達(dá),小劑量參附組復(fù)蘇后各時(shí)相與復(fù)蘇組相比無(wú)顯著差異(p>0.05),大劑量參附組從復(fù)蘇后

8、3h起較復(fù)蘇組增加(p<0.01);皮層NSE表達(dá),小劑量參附組在復(fù)蘇后24h較復(fù)蘇組增加(p<0.01),大劑量參附組從復(fù)蘇后3h起較復(fù)蘇組增加(p<0.05或p<0.01);海馬CA1區(qū)、皮層NSE表達(dá),大劑量參附組從復(fù)蘇后6h較小劑量參附組顯著增加(p<0.05或p<0.01). 結(jié)論： 1.大鼠心肺復(fù)蘇早期心肌損傷進(jìn)行性加重,參附注射液能有效減輕復(fù)蘇后心肌損傷,且該作用大劑量應(yīng)用可能更明顯. 2.大鼠心肺