烏桕優(yōu)株遺傳多樣性研究.pdf

1、本文采用湖南、廣東、安徽等地采集的烏桕(Sapium sebiferum)優(yōu)株種子進行播種育苗，形態(tài)特性與DNA分析相結(jié)合對烏桕優(yōu)株進行遺傳多樣性研究。觀測優(yōu)株種子及其幼苗的生物學特性，并以幼苗葉片為材料，應(yīng)用ISSR分子標記技術(shù)對6個種源的32個優(yōu)株遺傳特性進行分析。建立起烏桕ISSR-PCR反應(yīng)體系，探討了種源內(nèi)及種源間的遺傳變異及分化，為烏桕優(yōu)良種質(zhì)資源選擇提供理論依據(jù)。主要結(jié)果如下:
　　 (1)不同種源優(yōu)株子代1年生幼

2、苗苗高、地徑生長呈顯著差異;根據(jù)幼苗1年生長規(guī)律，將烏桕幼苗生長劃分為4個生長階段;根據(jù)種子含油率和幼苗生長狀況，優(yōu)株21#綜合表現(xiàn)最佳。
　　 (2)采用單因子和L16(45)正交試驗相結(jié)合，確立了普適性較強的PCR反應(yīng)體系(20μL):Mg2+3.0mmol/L，dNTP0.35mmol/L，引物0.7μmol/L，Taq聚合酶2.5U，DNA模板75ng，并含有2μL10×buffer(Mg2+free)，退火溫度為50～

3、56℃。
　　 (3)利用篩選出的10條ISSR引物對烏桕不同種源32個樣本進行了遺傳結(jié)構(gòu)分析，共檢測到125個位點，其中多態(tài)性位點數(shù)為118個，比率高達94.40％，表現(xiàn)出烏桕優(yōu)株豐富的遺傳多樣性。
　　 (4)應(yīng)用PopGen32軟件分析烏桕遺傳變異，得出有效等位基因(Ne）為1.4731，基因多樣性指數(shù)(H)為0.2822，Shannon多樣性指數(shù)(I)為0.4321，說明在物種水平上烏桕具有較高的遺傳多樣性。烏桕

4、總種群基因多樣性(Ht)為0.2586，群內(nèi)的基因多樣性(Hs）為0.1450，遺傳分化系數(shù)(Gst)為0.4395，即群體間的變異占43.95％，而群體內(nèi)的變異占56.05％，說明群體內(nèi)和群體間都存在較大變異。
　　 (5)通過不同種源間UPGMA聚類圖得出，聚類與種源地的相關(guān)性不顯著。運用NTSYS軟件分析，得到不同烏桕優(yōu)株的遺傳相似性系數(shù)范圍在0.368～1.000，獲得了親緣關(guān)系最近的3#和6#、20#和21#，結(jié)合表型