基于生物大分子修飾電極的電化學生物傳感—葡萄糖氧化酶直接電化學檢測葡萄糖和黃曲霉毒素快速檢測.pdf

1、電化學生物傳感技術(shù)，因其價格低廉、靈敏度高以及易于自動化、微型化的優(yōu)點，被認為是一種有著廣闊發(fā)展前景的分析測試方法。本論文以葡萄糖和黃曲霉毒素B1(AflatoxinB1,AFB1)為研究對象，用玻碳電極（GlassyCarbonElectrode,GCE）、金電極作為基礎(chǔ)電極，利用生物電化學傳感技術(shù)，分別制備了葡萄糖的酶傳感器、黃曲霉毒素B1的免疫傳感器及DNA損傷傳感器。
　　本論文的主要工作包括：
　　1.固定在大孔有

2、序SiO2泡沫修飾GCE上葡萄糖氧化酶的直接電化學
　　以修飾GCE為基礎(chǔ)，確定了用葡萄糖氧化酶@大孔SiO2修飾方法作為實現(xiàn)葡萄糖氧化酶直接電化學的修飾方法。論文通過一系列的實驗選擇確定修飾電極的最適條件，最后確定該修飾電極的最適PBS緩沖溶液的pH值為7.0，最適葡萄糖氧化酶修飾濃度為550UmL-1，最適的大孔SiO2的修適量為7μg。用電流-時間曲線（i-t曲線）得到了葡萄糖的標準曲線，其線性方程為i(μA)=3.205C

3、+1.067，相關(guān)性系數(shù)R為0.999，線性檢測范圍為50~1850μmolL-1，表觀米氏常數(shù)為2.073mmolL-1。
　　2．AFB1單克隆抗體修飾金電極制備AFB1免疫傳感器
　　制備了快速檢測黃曲霉毒素B1的黃曲霉毒素B1抗體@納米金修飾金電極電化學傳感器單元。實驗選用交流阻抗圖譜（EIS）、循環(huán)伏安法（CV）和示差脈沖伏安法（DPV）研究黃曲霉毒素B1在修飾電極上的電化學響應(yīng)，確定了該傳感器測定黃曲霉毒素B1的

4、最優(yōu)實驗條件（黃曲霉毒素B1單克隆抗體的最適修飾條件為4℃、8h，PBS緩沖溶液的最適pH值為7.4），建立了測定黃曲霉毒素B1的電化學方法，其線性方程為：i(μA)=0.02166C+18.8682，線性相關(guān)系數(shù)R=0.9997；線性檢測范圍為1.427~150ngmL-1，對不同豬飼料樣品檢測的加標回收率在94.44~101.36%。
　　3．DNA自組裝損傷傳感器檢測黃曲霉毒素
　　以ss-DNA修飾金電極為基礎(chǔ)，以亞