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文檔簡介
1、作為一種重要中間體,α-蒎烯可以合成多種物質(zhì),如殺蟲劑、藥物等。作為新型的天然植物源殺蟲劑,α-蒎烯市場前景極為廣闊。本文中以代謝控制發(fā)酵理論為指導,對構(gòu)建菌株YJM28進行搖瓶培養(yǎng)條件、發(fā)酵條件的優(yōu)化,并且對其發(fā)酵動力學分別進行研究。主要內(nèi)容如下:
(1)利用GC法測定發(fā)酵液頂空中α-蒎烯含量。色譜條件為Innowax HP-1柱,高純氮為流動相,柱溫升溫程序如下:50℃保留0.5 min,4℃/min升溫至70℃,再20℃
2、/min升溫至250℃,保留10 min,流速為1 mL/min,檢測器為FID,其溫度和氣化室溫度為200℃。α-蒎烯在0.25-40 mg/L范圍內(nèi),線性回歸較好(R2=0.9993)。該方法簡單、快速、準確性高,適合于α-蒎烯的在線分析。
(2)重點研究YJM28菌株的搖瓶發(fā)酵條件。利用Central-Composed design和相應曲面分析法優(yōu)化出發(fā)酵培養(yǎng)基的配比,優(yōu)化之后的培養(yǎng)基為(g/L):葡萄糖2.47 g/
3、L,蛋白胨5.6 g/L,微量元素溶液63.78μL/100mL,IPTG濃度0.04mmol/L,檸檬酸鐵銨0.15 g/L,MgSO4溶液8mmol/L,三水合磷酸氫二鉀4.9g/L,一水合檸檬酸0.525 g/L。并且對種子培養(yǎng)條件和發(fā)酵條件進行了優(yōu)化,優(yōu)化后的搖瓶發(fā)酵培養(yǎng)條件:發(fā)酵培養(yǎng)基初始pH6.4;裝液量100mL/590mL厭氧搖瓶;轉(zhuǎn)速是180 r/min;發(fā)酵溫度是30℃。在此條件下,YJM28菌株分批發(fā)酵48h,產(chǎn)α
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