生物表面活性劑產(chǎn)生菌的優(yōu)化培養(yǎng)及在稠油降粘中的應(yīng)用研究.pdf

1、本研究首先利用藍(lán)色凝膠平板培養(yǎng)法進(jìn)行菌種篩選，從華北某油田的受污染土壤中分離篩選得到一株性能較好的生物表面活性劑產(chǎn)生菌H1。對這株菌進(jìn)行生理生化試驗(yàn)和16s rRNA基因序列相似性分析以確定其種屬，并對其所合成的生物表面活性劑進(jìn)行提取以進(jìn)行產(chǎn)物的薄層色譜和紅外光譜分析，進(jìn)而確定其該生物表面活性的種類。結(jié)果表明，該菌株經(jīng)鑒定為肺炎克雷伯氏菌（Klebsiella pneumoniae）。薄層色譜和紅外光譜分析表明，所提取的物質(zhì)遇磷脂類指示

2、劑有顯色反應(yīng)，紅外光譜數(shù)據(jù)表明存在碳氧雙鍵(C=O)和磷脂鍵(P-O-C)，由此可推斷菌株H1所產(chǎn)生物表面活性劑為磷脂類生物表面活性劑，其產(chǎn)量可達(dá)到0.7 g/L。后期實(shí)驗(yàn)中，采用油平板篩選法代替藍(lán)色凝膠平板篩選法，從遼河油田某處土樣中分離篩選出一株性能更為優(yōu)良的生物表面活性劑產(chǎn)生菌，并將其命名為A3。對其進(jìn)行生理生化實(shí)驗(yàn)和16s rRNA基因序列相似性分析初步鑒定。結(jié)果表明，菌株A3為銅綠色假單胞菌。對該菌所合成的生物表面活性劑進(jìn)行提

3、取純化，再通過薄層層析和紅外光譜分析確定該生物表面活性劑的種類。對菌株A3的發(fā)酵培養(yǎng)條件進(jìn)行正交實(shí)驗(yàn)，選取的因子為碳源、氮源、溫度、pH值和NaCl濃度。評價(jià)生物表面活性劑性能的一個重要指標(biāo)就是它的穩(wěn)定性，對A3產(chǎn)生物表面活性劑進(jìn)行礦化度、溫度和酸堿度的穩(wěn)定性探究，并確定其臨界膠束濃度值(critical micelle concentration，CMC)以便進(jìn)行原油降粘實(shí)驗(yàn)。原油降粘實(shí)驗(yàn)包括:原油的粘度-溫度探究，生物表面活性劑添加

4、狀態(tài)對降粘率的影響，對溫度、礦化度的穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)，生物表面活性劑添加量-降粘率實(shí)驗(yàn)，生物表面活性劑、化學(xué)表面活性劑降粘性能的對比實(shí)驗(yàn)。結(jié)果表明，合成生物表面活性劑的最適條件為:30g/L葡萄糖，4g/L硝酸鈉，4g/L氯化鈉，初始pH值為6.0，最適培養(yǎng)溫度為30℃。在上述條件下，產(chǎn)量可達(dá)到5.5 g/L，是優(yōu)化前產(chǎn)量的5.4倍。菌株A3所產(chǎn)生物表面活性劑具有良好的礦化度穩(wěn)定性及溫度穩(wěn)定性。該生物表面活性劑對稠油的降粘率最大可達(dá)到96.7