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1、隨著能源危機(jī)的逐漸加劇,以可再生生物質(zhì)能替代化石工藝路線十分必要。丁醇作為生物燃料具有一定的競(jìng)爭(zhēng)優(yōu)勢(shì)。對(duì)于丁醇的生產(chǎn),目前主要的瓶頸在于丁醇產(chǎn)物抑制導(dǎo)致菌體發(fā)酵丁醇濃度不高,需要采用連續(xù)化發(fā)酵策略實(shí)現(xiàn)丁醇的高效生產(chǎn),并實(shí)現(xiàn)發(fā)酵分離耦合技術(shù),解除丁醇的產(chǎn)物抑制,節(jié)約分離成本與能耗。
本文立足與生物丁醇的高效連續(xù)化生產(chǎn),通過進(jìn)化工程手段篩選高產(chǎn)丁醇及高耐受丁醇的優(yōu)勢(shì)菌種,考察了菌體回收和細(xì)胞固定化連續(xù)發(fā)酵生物丁醇的工藝路線,并
2、對(duì)甜高粱渣固定化過程中植物蠟對(duì)丁醇發(fā)酵影響進(jìn)行探究。具體工作如下:
(1)利用進(jìn)化工程方法,連續(xù)馴化得到能夠穩(wěn)定遺傳的高產(chǎn)丁醇菌株C.acetobutylicum ABE1201-1和ABE1201-2,批次丁醇發(fā)酵濃度分別達(dá)到14.6g/L和14.26g/L。篩選得到了丁醇耐受性達(dá)19g/L的高耐受菌株C.acetobutylicum ABE1301。
(2)完成了二級(jí)菌體回收連續(xù)發(fā)酵不同稀釋率的考察,稀釋
3、率在0.08/h時(shí),丁醇發(fā)酵濃度維持在11~12g/L左右,殘?zhí)菨舛染S持在8~10g/L。在稀釋率為0.16/h時(shí)平均的丁醇產(chǎn)量在~12.5g/L上下,ABE產(chǎn)量在20.5g/L左右。
初步完成了二級(jí)菌體回收連續(xù)發(fā)酵與滲透汽化原位分離的耦合,成功分離得到含油水兩相的透過側(cè)液體,丁醇濃度在100~200g/L。
(3)采用甜高梁渣為固定化載體發(fā)酵生產(chǎn)丁醇,優(yōu)化了工藝參數(shù),在反復(fù)批次培養(yǎng)考察過程中,固定化工藝穩(wěn)定
4、性較好,在10批次發(fā)酵過程中,丁醇濃度維持在10~12g/L的水平,ABE濃度維持在18~20g/L。考察了單級(jí)甜高粱渣固定化連續(xù)發(fā)酵丁醇情況。在稀釋率為0.03/h的條件下,發(fā)酵液中丁醇濃度最大,達(dá)到~10g/L,ABE濃度在13.5g/L。當(dāng)稀釋率為率為0.12/h時(shí),ABE產(chǎn)率最大,在~0.96g/L·h。
(4)證實(shí)了高梁表皮植物蠟對(duì)生物煉制丁醇工藝過程中對(duì)梭菌的抑制作用,發(fā)現(xiàn)在植物蠟濃度為0.25g/L的發(fā)酵體系
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