3-羥基丙酸循環(huán)途徑里中康酰CoA分子內(nèi)轉(zhuǎn)移酶的表達(dá)、純化與結(jié)晶.pdf

1、Jan Zarzycki在前人的基礎(chǔ)上完善了橙色綠屈撓菌類的三羥基丙酸循環(huán)。在三羥基丙酸固碳途徑的開始，兩分子乙酰輔酶A羧化生成丙二酰輔酶A。然后被還原去輔酶A生成三羥基丙酸;在輔酶A合酶的作用下合成丙酰輔酶A。然后，丙酰輔酶A一分子進(jìn)入第一循環(huán)，一分子進(jìn)入第二循環(huán)。在第二個(gè)循環(huán)中，丙酰輔酶A在三功能裂解酶的作用下合成β-甲基蘋果酰輔酶A，隨后在脫水酶的催化下生成中康酰-C1-輔酶A。在中康酰-C4-輔酶A水合酶參與下，中康酰-C4-輔

2、酶A與水合成(S)-檸蘋酰輔酶A。最終被MMC裂解酶這個(gè)三功能裂解酶催化裂解為丙酮酸和乙酰輔酶A。到此，第二循環(huán)結(jié)束。而中康酰-C1-輔酶A是不能被中康酰-C4-輔酶A水合酶催化水合為(S)-檸蘋酰輔酶A。因此，我們推斷:有一種分子內(nèi)輔酶A轉(zhuǎn)移酶，在該酶作用下，中康酰-C1-輔酶A轉(zhuǎn)化為中康酰-C4-輔酶A(mesaconyl-CoA C1-C4 CoA transferase，以下簡稱MCT)。為研究這個(gè)分子內(nèi)的輔酶A轉(zhuǎn)移酶，本人將合