腦死亡大鼠肝移植氨基酸代謝組學(xué)的初步研究.pdf

1、肝臟移植是目前全世界公認(rèn)的治療終末期肝病的最有效方法，移植肝臟主要來(lái)源于腦死亡供體的捐獻(xiàn)，然而大量研究發(fā)現(xiàn)與正?；铙w供肝相比，腦死亡狀態(tài)促進(jìn)了肝臟炎癥反應(yīng)和組織損傷，啟動(dòng)肝臟移植缺血再灌注損傷的炎癥級(jí)聯(lián)反應(yīng)，嚴(yán)重影響了腦死亡供肝肝移植的效果。臨床肝移植術(shù)后對(duì)肝臟缺血再灌注及炎癥損傷的評(píng)估，對(duì)于判斷預(yù)后和臨床療效尤為重要。尋找能夠預(yù)測(cè)肝移植后缺血再灌注及炎癥損傷的特異性指標(biāo)及探究其發(fā)生機(jī)制對(duì)改善腦死亡供肝的移植患者預(yù)后十分重要。
　

2、　目的：
　　1.探究腦死亡大鼠肝移植與正常大鼠肝移植術(shù)后早期氨基酸代謝組學(xué)是否存在差異。
　　2.尋找腦死亡大鼠肝移植與正常大鼠肝移植術(shù)后差異性氨基酸。
　　方法：
　　正常雄性SD大鼠肝臟移植到另一雄性SD大鼠為正常肝移植組;建立穩(wěn)定腦死亡模型后，腦死亡SD大鼠肝臟移植到另一雄性SD大鼠身上為腦死亡肝移植組。術(shù)后6h進(jìn)行血清樣本搜集，樣本為大鼠尾靜脈取血后立即經(jīng)4℃、3000r、10mins離心處理后保存在-

3、80℃低溫冰箱內(nèi)。血清樣本先進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化處理及質(zhì)量檢測(cè)后，然后采用液相色譜質(zhì)譜分析(liquid chromatography/mass spectrometry，LC/MS)技術(shù)進(jìn)行代謝組學(xué)分析，利用主成分分析(principal components analysis，PCA)、偏最小二乘-判別分析（partial least square discriminant analysis，PLS-DA）模型分析兩組間的代謝輪廓。實(shí)驗(yàn)所得數(shù)

4、據(jù)以均數(shù)和標(biāo)準(zhǔn)差來(lái)表示，數(shù)據(jù)處理采用SPSS軟件21.0進(jìn)行處理，定量資料采用t檢驗(yàn)，以P＜0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。代謝模式特征圖用主成分分析(principle component analysis，PCA)方法和偏最小二乘-判別分析(partial least square discriminant analysis，PLS-DA)進(jìn)行處理，并根據(jù)處理結(jié)果相應(yīng)做出其代謝模式輪廓圖。
　　結(jié)果：
　　通過(guò)對(duì)正常大鼠肝移植和

5、腦死亡大鼠肝移植術(shù)后血清代謝組學(xué)分析，應(yīng)用LC/MS技術(shù)、PCA、PLS-DA等分析，最后發(fā)現(xiàn)腦死亡大鼠肝移植組與正常大鼠肝移植組術(shù)后早期存在代謝差異;與正常大鼠肝移植組相比，腦死亡大鼠肝移植組術(shù)后早期血清中4-羥基-L-脯氨酸(P=0.026)、酮亮氨酸(P=0.04)明顯降低。
　　結(jié)論：
　　1.腦死亡大鼠肝移植與正常大鼠肝移植術(shù)后早期氨基酸代謝組學(xué)存在差異。
　　2.與正常大鼠肝移植相比，腦死亡大鼠肝移植術(shù)后4