實(shí)驗(yàn)性炎癥性腸病動(dòng)物模型的建立及川芎嗪藥物干預(yù)研究.pdf

1、目的:炎癥性腸?。↖nflammatory bowel disease，IBD）包括克羅恩?。–rohn’s disease，CD）和潰瘍性結(jié)腸炎（Ulcerative colitis，UC），是一種病因未明的慢性非特異性腸道炎癥性疾病，具有慢性和反復(fù)發(fā)作的特點(diǎn)，在我國(guó)普遍流行。本研究擬分別建立CD和UC的動(dòng)物模型并對(duì)兩種動(dòng)物模型進(jìn)行驗(yàn)證，同時(shí)給予川芎嗪藥物干預(yù)，以研究川芎嗪對(duì)實(shí)驗(yàn)性腸炎是否有治療作用及其可能的分子機(jī)制。
　　方法

2、：分別建立TNBS誘導(dǎo)的CD大鼠模型和惡唑酮誘導(dǎo)的UC小鼠模型，并通過(guò)對(duì)病變腸段進(jìn)行組織損傷評(píng)分、流式分析外周血中Th1細(xì)胞和Th2細(xì)胞的數(shù)量及比例判斷造模結(jié)果。通過(guò)基因芯片技術(shù)和Western Blot驗(yàn)證兩種模型中差異表達(dá)的基因。使用不同劑量的川芎嗪對(duì)CD模型的大鼠和UC模型的小鼠進(jìn)行藥物干預(yù)，分別獲取其SMC、PBMC和LPMC，流式分析Th1細(xì)胞和Th2細(xì)胞的比例，Annexin V法檢測(cè)細(xì)胞凋亡率，并抽提LPMC的總RNA，R

3、T-PCR法檢測(cè)IL-4、IL-5、IL-10、IL-13、IL-33、VCAM-1、IL-2、IL-12、IFN-γ、TNF-ɑ、ICAM-1、iNOS、NF-κB、NF-AT、 AP-1和 P-selectin等多種細(xì)胞因子的表達(dá)差異。
　　結(jié)果：我們成功建立了CD大鼠模型和UC小鼠模型，并改良了CD的建模方法，證實(shí)了TNBS誘導(dǎo)的CD大鼠模型是一種以Th1亞群細(xì)胞占優(yōu)勢(shì)的腸粘膜局部免疫紊亂的模型，而惡唑酮誘導(dǎo)的UC模型是一種

4、以Th2亞群細(xì)胞占優(yōu)勢(shì)的腸黏膜局部免疫紊亂的模型。我們通過(guò)基因芯片和WB發(fā)現(xiàn)在CD模型中，TSC-22、STAT3、IFITM1和PAI-2的表達(dá)是上調(diào)的，Galectin-9和MIP-1a的表達(dá)是下調(diào)的；在UC模型中，IgHG3、PAI-2和NOS2A的表達(dá)是上調(diào)的，MDR1、HGF和PXR的表達(dá)是下調(diào)的。我們發(fā)現(xiàn)2mg/ml的川芎嗪能顯著抑制 CD模型的大鼠和 UC模型的小鼠的P-selectin的表達(dá)、促進(jìn)LPMC的凋亡，并分別抑