基于化學(xué)成分特征的天麻真?zhèn)舞b別及質(zhì)量評(píng)價(jià)研究.pdf

1、中藥天麻來源于蘭科植物天麻Gastrodia elataBl.的干燥塊莖；為常用的名貴中藥，也是我國衛(wèi)生部規(guī)定的可用于保健食品的原料。天麻的用量大,貨源短缺，價(jià)格高，有以羊角天麻等偽品充當(dāng)天麻銷售的現(xiàn)象，真?zhèn)坞y以鑒別。同時(shí)，在商品流通中，根據(jù)天麻的性狀特征分為四個(gè)等級(jí)，還有栽培天麻和野生天麻之分。這些不同商品規(guī)格及等級(jí)天麻之間的價(jià)格差異很大，但質(zhì)量優(yōu)劣不明確。目前，天麻的真?zhèn)舞b別多用傳統(tǒng)經(jīng)驗(yàn)鑒別法，標(biāo)準(zhǔn)化程度低，不易掌握；質(zhì)量評(píng)價(jià)僅以天

2、麻素含量為指標(biāo)。根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道和課題組前期的研究工作結(jié)果表明，現(xiàn)行的鑒定方法難于有效地鑒別和評(píng)價(jià)天麻藥材的質(zhì)量。為此，本文運(yùn)用現(xiàn)代分析技術(shù)，針對(duì)天麻的真?zhèn)?、?yōu)劣鑒定開展了以下三方面的研究工作：
　　第一、天麻藥材HPLC指紋圖譜的建立：通過優(yōu)化供試液制備方法和色譜條件，建立了得到分離度良好HPLC圖譜的方法。對(duì)收集的27份天麻藥材，5份天麻飲片，3份天麻粉末和3份冷凍干燥天麻樣品進(jìn)行測定，發(fā)現(xiàn)這38份天麻樣品的HPLC圖譜相似，具有

3、共同的化學(xué)特性；選擇11個(gè)峰為天麻藥材HPLC圖譜的共有峰；經(jīng)對(duì)照品、保留時(shí)間和UV光譜比較，鑒定了7個(gè)峰，分別為天麻素、對(duì)羥基苯甲醇、巴利森苷 A、巴利森苷 B、巴利森苷 C、巴利森苷 E和腺苷。再計(jì)算這27份天麻藥材HPLC圖譜的平均圖譜，作為天麻藥材的HPLC指紋圖譜。27份天麻藥材與指紋圖譜的相似度大于0.780；27份天麻藥材的聚類分析結(jié)果表明，除1份采收過種子的天麻塊莖外，其余樣品聚類相對(duì)較好。進(jìn)一步對(duì)雙舌蟹甲草（羊角天麻）

4、、洋芋、芋、美人蕉、黃精、紅薯、栝樓等9份常見天麻的偽品進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)這些偽品的HPLC圖譜與天麻HPLC指紋圖譜明顯不同，未發(fā)現(xiàn)天麻素和巴利森苷類成分的峰，且與天麻指紋圖譜之間的相關(guān)系數(shù)低于0.042。對(duì)1份天麻酒的測定結(jié)果表明，其HPLC圖譜與建立的HPLC指紋圖譜相似，相關(guān)系數(shù)為0.966。說明所建立的天麻藥材HPLC指紋圖譜可準(zhǔn)確鑒別天麻的真?zhèn)巍?br>　　第二、天麻藥材 FTIR指紋圖譜的建立：通過樣品制備和光譜條件優(yōu)化，建立

5、了天麻FTIR光譜的測定方法。對(duì)27份天麻藥材和5份天麻飲片的紅外光譜及其二階導(dǎo)數(shù)光譜的分析結(jié)果表明，天麻的紅外光譜相似，其特征峰位于2929,1642,1515,1415,1371,1237,1154,1079,1023,930和857cm-1；并且在1154,1079和1023 cm-1的三個(gè)峰呈現(xiàn)明顯的“階梯峰”。通過計(jì)算27份天麻藥材FTIR光譜的平均圖譜作為天麻藥材的FTIR指紋圖譜。32份天麻藥材和飲片在1800~800 c

6、m-1范圍內(nèi)的紅外光譜與指紋圖譜的相關(guān)系數(shù)大于0.9771。進(jìn)一步比較15份冬天麻與12份春天麻的紅外光譜，發(fā)現(xiàn)兩者紅外光譜峰的強(qiáng)度有明顯區(qū)別。春天麻在1730 cm-1和1515 cm-1附近的吸收峰強(qiáng)于冬天麻，但是，位于1154,1079和1023cm-1的“階梯峰C”不如冬天麻明顯。說明可用FTIR指紋圖譜區(qū)別冬天麻與春天麻。對(duì)雙舌蟹甲草（羊角天麻）、洋芋、芋、美人蕉、黃精、紅薯、栝樓等9份常見天麻偽品紅外光譜的分析表明，這些偽品

7、的紅外光譜中未發(fā)現(xiàn)1515cm-1芳香環(huán)骨架伸縮振動(dòng)吸收峰，也多未見1154,1079和1023 cm-1的“階梯峰C”。說明紅外光譜可快速、準(zhǔn)確地鑒別天麻的真?zhèn)巍?br>　　第三、天麻商品等級(jí)與主要活性成分的相關(guān)性研究：首先，通過對(duì)樣品提取時(shí)間、溶劑、方法、色譜及光譜條件的考察和方法學(xué)驗(yàn)證，建立了HPLC測定天麻素、總天麻素、對(duì)羥基苯甲醇、腺苷的方法和苯酚-硫酸法測定天麻多糖的方法。并針對(duì)天麻中天麻素的含量與傳統(tǒng)經(jīng)驗(yàn)鑒別和商品等級(jí)劃分

8、相關(guān)性不顯著的問題，根據(jù)天麻素、對(duì)羥基苯甲醇、腺苷、多糖在天麻中含量高低及活性大小，采用加權(quán)評(píng)分法設(shè)置了各成分的權(quán)重系數(shù)，建立了以天麻素、多糖等為指標(biāo)成分綜合評(píng)價(jià)天麻藥材質(zhì)量的方法。其次，對(duì)35份冬天麻和11份春天麻進(jìn)行了比較，發(fā)現(xiàn)兩者中天麻素、總天麻素和多糖的含量明顯不同（P<0.05）。冬天麻中天麻素含量（0.45％，n=35）比春天麻中天麻素含量（0.68%，n=11）低51.11%，冬天麻中總天麻素含量（1.98%，n=35）比

9、春天麻中天麻素含量（2.47%，n=11）低24.75%；相反，冬天麻中多糖的含量（26.75%，n=35）比春天麻中多糖含量（20.86%，n=11）高28.24%。兩種商品天麻中對(duì)羥基苯甲醇和腺苷的含量沒有明顯差異（P>0.05）。說明春天麻在土壤中越冬，春季發(fā)芽生長過程中，多糖消耗，含量降低；相反，天麻素及巴利森苷類等成分的含量可能因天麻質(zhì)量減輕而相對(duì)升高。由此可見，天麻性狀鑒別的優(yōu)劣與以天麻素為指標(biāo)的評(píng)價(jià)結(jié)果不符，反而與以天麻多

10、糖為指標(biāo)的評(píng)價(jià)結(jié)果相符。再次，根據(jù)天麻的分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，將35份冬天麻樣品分為四個(gè)等級(jí)，比較天麻素、總天麻素、對(duì)羥基苯甲醇、腺苷和多糖的含量，并用加權(quán)法計(jì)算綜合得分?？偟内厔菔且弧⒍忍炻橹羞@些成分的含量和得分高于三、四等。多糖含量與等級(jí)之間的相關(guān)性更明顯，分別為33.71%（n=8，一等）、34.44%（n=9，二等）、21.82%（n=11，三等）和16.68%（n=7，四等）。表明天麻重量越大，多糖含量及綜合評(píng)分越高。這與傳統(tǒng)經(jīng)驗(yàn)鑒別天

11、麻質(zhì)量以個(gè)大、質(zhì)堅(jiān)實(shí)者為佳相符合。由此可見，天麻多糖的含量和建立的多成分綜合評(píng)價(jià)方法，可作為天麻等級(jí)劃分的指標(biāo)。最后，比較了四川、云南、陜西、湖北產(chǎn)天麻樣品中天麻素等成分的含量，發(fā)現(xiàn)四川、云南、陜西等天麻道地產(chǎn)區(qū)的天麻樣品中天麻素和多糖等含量較高，綜合評(píng)分也相對(duì)較高，四川省（50.60，n=12）>陜西?。?6.72，n=7）>云南?。?2.16，n=11）>湖北?。?4.44，n=4）。表明天麻藥材品質(zhì)與產(chǎn)地有關(guān)。
　　此外，對(duì)