N-乙酰半胱氨酸對(duì)糖尿病大鼠肝臟成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子21表達(dá)影響的初步研究.pdf

1、研究背景：
　　成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子21（FGF21）是成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子（FGF）家族的一員，最先由Nishimura等首次于2000年發(fā)現(xiàn)，主要在肝臟及脂肪組織合成的內(nèi)分泌激素，可以以自分泌、旁分泌及內(nèi)分泌的方式發(fā)揮激素樣作用，并在糖脂代謝中起重要作用。一項(xiàng)新的研究發(fā)現(xiàn)FGF21的產(chǎn)生與氧化應(yīng)激有關(guān)，而N-乙酰半胱氨酸(NAC)可以通過其自身-SH的還原性及脫乙?；笊?GSH的特性，使組織對(duì)抗氧化應(yīng)激的能力增強(qiáng)。NAC能否通

2、過其抗氧化作用調(diào)節(jié)糖尿病大鼠肝臟的FGF21的表達(dá)尚未見相關(guān)報(bào)道。
　　研究目的：
　　探討NAC對(duì)于DM大鼠肝臟FGF21表達(dá)的影響。
　　研究方法：
　　1.以Wistar大鼠為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,予以一次性注射STZ(45mg／kg)建立DM大鼠模型。隨機(jī)分為NC組、DM組及DM+NAC干預(yù)組，觀察周期分別為6W和12W。
　　2.定期檢測(cè)大鼠一般情況及隨機(jī)血糖、血脂、肝酶學(xué)指標(biāo)及MDA、SOD等指標(biāo)變化。

3、r>　　3.通過免疫組織化學(xué)法觀察肝臟中FGF21的表達(dá)位置及各組FGF21的相對(duì)表達(dá)量。
　　4.采用Western Blot法檢測(cè)6W及12W各組FGF21蛋白在肝臟中的表達(dá)變化。
　　5.應(yīng)用實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)檢測(cè)6周及12周各組肝臟FGF21mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
　　結(jié)果：
　　1.成功建立1型糖尿病大鼠模型。
　　2.與同期NC組大鼠比較，DM組及NAC干預(yù)組的大鼠其多飲、多尿、多食及消瘦癥狀明

4、顯，體重下降顯著（P<0.05），隨機(jī)血糖升高顯著（P<0.05）。
　　3.與同期 NC組比較，DM組及 NAC干預(yù)組其肝功血脂均明顯升高（P<0.01）；NAC組較同期DM組相比ALT、TG均有所改善，統(tǒng)計(jì)學(xué)差異顯著（P<0.05），AST、TC有下降趨勢(shì)，但差異不顯著。
　　4.與同期NC組比較，DM組及NAC組其MDA水平均明顯升高，SOD活性均明顯降低（P<0.01）；NAC同期 DM組相比 MDA水平有所下降，S

5、OD活性有所上升，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
　　5.免疫組化結(jié)果顯示FGF21表達(dá)于肝細(xì)胞胞漿，以中央靜脈周圍較豐富，與NC組相比DM組表現(xiàn)為棕黃色顆粒的先增加后減少，NAC干預(yù)組則表現(xiàn)為棕黃色顆粒的逐漸增加。
　　6.Western-Blot結(jié)果顯示W(wǎng)estern blot結(jié)果顯示DM6周組及NAC6周組FGF21表達(dá)量顯著高于同期NC組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。DM12周組FGF21表達(dá)量明顯低于

6、同期 NC組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，NAC干預(yù)12周組的FGF21表達(dá)量則明顯高于同期對(duì)照組。且隨著時(shí)間的延長(zhǎng)糖尿病組FGF21蛋白表達(dá)量呈先升后降趨勢(shì)，而NAC干預(yù)組則呈逐漸上升趨勢(shì)。
　　7.實(shí)時(shí)定量PCR結(jié)果顯示：DM6W組FGF21mRNA相對(duì)表達(dá)顯著高于同期NC組及NAC干預(yù)6W組，統(tǒng)計(jì)學(xué)差異顯著(P<0.05)；DM12 W組FGF21表達(dá)量明顯低于同期NC組及NAC干預(yù)組，統(tǒng)計(jì)學(xué)差異顯著(P<0.05)

7、。隨著觀察周期的延長(zhǎng)，DM組及NAC干預(yù)組FGF21mRNA的表達(dá)均呈先升后降趨勢(shì)。
　　結(jié)論：
　　1.糖尿病可造成肝臟損傷，并造成氧化抗氧化系統(tǒng)的不平衡。
　　2.6周及12周正常對(duì)照組大鼠其肝臟FGF21mRNA相對(duì)表達(dá)量及FGF21蛋白表達(dá)量均無明顯差異。
　　3.與正常對(duì)照組相比，糖尿病組及NAC干預(yù)組肝臟FGF21的mRNA相對(duì)表達(dá)量均呈先升后降趨勢(shì)。
　　4.隨糖尿病時(shí)間的延長(zhǎng)，糖尿病組肝臟F