熱應(yīng)激預(yù)處理對梗阻性黃疸大鼠腎功能的影響.pdf

1、目的：對熱應(yīng)激預(yù)處理后的大鼠建立梗阻性黃疸模型，觀察梗阻性黃疸大鼠的腎臟尿素氮和血清肌酐變化，研究熱應(yīng)激預(yù)處理對梗阻性黃疸大鼠腎功能的影響，尋找預(yù)防梗阻性黃疸術(shù)后急性腎功能衰竭的手段。 方法：將30只Wistar大鼠隨機(jī)分為3組：膽總管結(jié)扎組(B組)，假手術(shù)組(S組)，熱應(yīng)激預(yù)處理+膽總管結(jié)扎組(H組)。3組均在乙醚開放麻醉下，腹部剃毛，用1％的碘伏消毒切口2次，經(jīng)劍突下正中小切口進(jìn)腹，游離出膽總管，膽總管結(jié)扎組于肝門部和其遠(yuǎn)端

2、用6/0的絲線分別結(jié)扎膽總管，中間予以切斷。腹部切口用4/0的絲線分兩層縫合。其中假手術(shù)組接受同樣手術(shù)，但只游離膽總管而不結(jié)扎膽總管，熱應(yīng)激預(yù)處理組在膽總管結(jié)扎手術(shù)前進(jìn)行熱應(yīng)激預(yù)處理，具體方法為：將大鼠麻醉后置于42℃帶鼓風(fēng)裝置的恒溫干燥箱內(nèi)，20分鐘后取出，12小時(shí)后進(jìn)行膽總管結(jié)扎手術(shù)。術(shù)后大鼠自由進(jìn)食飼料和水，不予補(bǔ)液和抗生素治療。術(shù)后1周處死大鼠，穿刺心臟取血2ml置于促凝管內(nèi)，用全自動(dòng)生化分析儀檢測肝腎功能。觀察腎臟組織病理改變

3、并采用免疫組織化學(xué)SABC法觀察大鼠腎臟HSP70的表達(dá)。 結(jié)果：1、術(shù)中無大鼠死亡，術(shù)后1周內(nèi)所有大鼠均存活。梗阻性黃疸大鼠膽總管結(jié)扎48h后大鼠尿液顏色開始變黃，4～5日時(shí)全身皮毛開始黃染，進(jìn)食量逐漸減少，精神萎靡不振，活動(dòng)減少。術(shù)后1周，梗阻性黃疸大鼠近肝側(cè)膽總管囊狀擴(kuò)張，肝臟彌漫性腫大，呈黃褐色，部分大鼠腹腔內(nèi)有少量淡黃色滲液，腎臟腫大，質(zhì)地變硬。 2、常規(guī)病理切片觀察：膽總管結(jié)扎組大鼠腎臟組織表現(xiàn)為腎小管上皮細(xì)

4、胞重度空泡變性，灶狀腎小管擴(kuò)張，上皮細(xì)胞變扁平，刷狀緣脫落。熱應(yīng)激預(yù)處理+膽總管結(jié)扎組大鼠腎臟組織常規(guī)病理切片表現(xiàn)為腎小管上皮細(xì)胞中度空泡變性。假手術(shù)組大鼠腎臟組織表現(xiàn)為腎小管上皮細(xì)胞輕度空泡變性。 3、各組實(shí)驗(yàn)檢查指標(biāo)發(fā)現(xiàn)，對梗阻性黃疸大鼠進(jìn)行熱應(yīng)激預(yù)處理膽總管結(jié)扎后1周，大鼠血膽紅素明顯升高，血清肌酐隨之明顯升高，但熱應(yīng)激預(yù)處理+膽總管結(jié)扎組的血清肌酐升高幅度較小。各組實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下：(1)血清肌酐：膽總管結(jié)扎組56.1±0.

5、2ummol/L，假手術(shù)組46.1±0.3ummol/L，熱應(yīng)激預(yù)處理+膽總管結(jié)扎組48.3±0.7ummol/L。(2)血清膽紅素：膽總管結(jié)扎組62.5±10.4ummol/L，假手術(shù)組1.8±0.7ummol/L，熱應(yīng)激預(yù)處理+膽總管結(jié)扎組47,8±9.6ummol/L。熱應(yīng)激預(yù)處理+膽總管結(jié)扎組與膽總管結(jié)扎組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，膽總管結(jié)扎組與假手術(shù)組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 4.免疫組化結(jié)果表明：HSP70主要在大