桔小實(shí)蠅對(duì)常用殺蟲劑的敏感性及其3種解毒酶酶學(xué)特性研究.pdf

1、本學(xué)位論文以桔小實(shí)蠅Bactrocera dorsalis為研究對(duì)象，采用局部點(diǎn)滴法測(cè)定了桔小實(shí)蠅不同地理種群對(duì)有機(jī)磷類殺蟲劑（辛硫磷、三唑磷、毒死蜱和馬拉硫磷）、擬除蟲菊酯類殺蟲劑（高效氯氰菊酯和溴氰菊酯）、苯基吡唑類殺蟲劑（氟蟲腈）、生物源類殺蟲劑（阿維菌素）和煙堿類殺蟲劑（吡蟲啉）等9種殺蟲劑的敏感性;在此基礎(chǔ)上，選用3種增效劑磷酸三苯酯(TPP)、順丁烯二酸二乙酯(DEM)和胡椒基丁醚(PBO)，研究了它們對(duì)不同殺蟲劑的增效效果

2、;為闡明桔小實(shí)蠅對(duì)高效氯氰菊酯產(chǎn)生抗性的潛在機(jī)理，本研究在增效實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上研究了增效劑對(duì)桔小實(shí)蠅3種解毒代謝酶活性的影響。研究工作得到了國(guó)家973計(jì)劃前期研究專項(xiàng)(2009CB125903)和重慶市杰出青年科學(xué)基金項(xiàng)目(CSTC2009BA1042)的資助，經(jīng)過(guò)2年多的研究，獲得以下主要結(jié)果:
　　 1.桔小實(shí)蠅不同地理種群對(duì)9種殺蟲劑的敏感性測(cè)定
　　 采用局部點(diǎn)滴法測(cè)定了桔小實(shí)蠅東莞(DG)、廣州(GZ)、?？?HK

3、)和昆明（KM）4個(gè)種群對(duì)有機(jī)磷類、擬除蟲菊酯類、苯基吡唑類、生物源類和煙堿類9種殺蟲劑的敏感性。生物測(cè)定結(jié)果表明:桔小實(shí)蠅同一地理種群對(duì)不同藥劑的敏感性存在差異;桔小實(shí)蠅不同地理種群對(duì)同一種殺蟲劑的敏感性亦存在差異。其中，氟蟲腈對(duì)桔小實(shí)蠅4個(gè)種群的毒殺作用效果最好，而馬拉硫磷和吡蟲啉均較差。桔小實(shí)蠅對(duì)其他殺蟲劑的敏感性在4個(gè)種群中的效果分別為:昆明種群，由強(qiáng)到弱依次為辛硫磷、阿維菌素、三唑磷、高效氯氰菊酯、毒死蜱、溴氰菊酯;?？诜N群，

4、由強(qiáng)到弱依次為溴氰菊酯、三唑磷、阿維菌素、辛硫磷、毒死蜱、高效氯氰菊酯;東莞種群，由強(qiáng)到弱依次為三唑磷、辛硫磷、毒死蜱、阿維菌素、溴氰菊酯、高效氯氰菊酯;廣州種群，由強(qiáng)到弱依次為辛硫磷、三唑磷、毒死蜱、阿維菌素、溴氰菊酯、高效氯氰菊酯。
　　 2.增效劑對(duì)9種殺蟲劑的增效作用研究
　　 通過(guò)增效實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn):就同一種增效劑而言，其對(duì)相同的殺蟲劑的增效效果在不同種群間存在差異;相同地理種群中，同一種增效劑對(duì)不同的殺蟲劑亦表現(xiàn)出

5、不同的增效效果。對(duì)有機(jī)磷類殺蟲劑來(lái)說(shuō)，PBO、TPP和DEM可以明顯增強(qiáng)馬拉硫磷對(duì)桔小實(shí)蠅東莞種群、三唑磷對(duì)桔小實(shí)蠅昆明種群的毒殺作用，PBO和TPP對(duì)毒死蜱在昆明種群中表現(xiàn)出較好的增效作用，TPP在廣州種群中對(duì)三唑磷的增效作用較好，而3種增效劑對(duì)辛硫磷的作用效果普遍較差，甚至表現(xiàn)出負(fù)增效效果。對(duì)擬除蟲菊酯類殺蟲劑來(lái)說(shuō)，在昆明種群中，3種增效劑對(duì)高效氯氰菊酯的增效作用較好，但對(duì)溴氰菊酯的增效作用較差;在東莞種群中，3種增效劑無(wú)論是對(duì)高效

6、氯氰菊酯還是溴氰菊酯均表現(xiàn)出較好的增效作用;在?？诜N群中，除PBO和DEM對(duì)高效氯氰菊酯的增效作用較好外，其它增效劑對(duì)高效氯氰菊酯和溴氰菊酯的增效效果均較差;在廣州種群中，3種增效劑對(duì)兩種殺蟲劑的增效作用均較好，且對(duì)溴氰菊酯的增效作用效果優(yōu)于對(duì)高效氯氰菊酯的效果。從3種增效劑對(duì)生物源類殺蟲劑阿維菌素的增效效果可以看出，在桔小實(shí)蠅昆明和東莞種群中，3種增效劑的增效效果均為PBO最好、TPP次之，DEM較差;而在桔小實(shí)蠅?？诤蛷V州種群中，3

7、種增效劑的增效作用均為DEM最好、PBO次之，TPP最差。但3種增效劑對(duì)苯基吡唑類殺蟲劑氟蟲腈和煙堿類殺蟲劑吡蟲啉的增效作用不明顯。
　　 3.增效劑對(duì)桔小實(shí)蠅解毒代謝酶活性的影響
　　 經(jīng)不同濃度藥劑處理后，桔小實(shí)蠅體內(nèi)谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶(GSTs)、羧酸酯酶(CarEs)和細(xì)胞色素P450(P450)活性在24h內(nèi)均呈現(xiàn)出動(dòng)態(tài)的變化過(guò)程，這可能是桔小實(shí)蠅為適應(yīng)外部的刺激而產(chǎn)生的一種自然反應(yīng)過(guò)程。研究發(fā)現(xiàn):不同增效劑對(duì)

8、3種解毒代謝酶的抑制情況不盡相同，TPP抑制了CarEs的活性。單個(gè)組織中酶的活性明顯高于整頭蟲，GSTs、P450和CarEs的活性在脂肪體、馬氏管和中腸存在差異，CarEs活性在脂肪體最高，GSTs活性在中腸最高，P450活性在馬氏管最高;GSTs和P450兩種酶的活性被相對(duì)應(yīng)的增效劑抑制;不同增效劑對(duì)不同組織中3種解毒代謝酶的抑制情況也不相同，表明桔小實(shí)蠅在對(duì)高效氯氰菊酯的解毒代謝過(guò)程中不同組織的功能不同。同時(shí)，研究表明3種解毒代