藤椒水提液中黃酮含量測定及抑菌、抗氧化活性的研究.pdf

1、藤椒學(xué)名竹葉花椒(Zanthoxylum armatum DC.Prodr.)，屬于蕓香科花椒屬花椒亞屬，是我國花椒種質(zhì)資源中的一個優(yōu)良地方品種，具有獨特的麻香風(fēng)味。藤椒中含有豐富的黃酮類物質(zhì)，具有清除自由基、治療心血管系統(tǒng)疾病、降血脂、降血壓、抗病毒、抗癌鎮(zhèn)痛、抗炎、抗菌等功能，開發(fā)利用前景廣闊。本文以四川洪雅藤椒為原料，通過水蒸氣蒸餾法得到藤椒水提液，研究其黃酮成分及抑菌和體外抗氧化活性，以期為藤椒的進一步開發(fā)利用提供一定的實驗和理

2、論依據(jù)。采用單因素試驗優(yōu)化提取工藝，通過水蒸氣蒸餾法制得水提液;通過雙水相萃取進行初步分離純化后，對不同萃取部分進行黃酮含量、還原力大小及兩者相關(guān)性分析;對不同萃取部分的黃酮類物質(zhì)進行HPLC（高效液相色譜）分析;并進行體外抗氧化試驗和抑菌試驗。主要研究結(jié)論如下:
　　1.通過水蒸氣蒸餾法制備藤椒水提液，采用單因素試驗優(yōu)化制備工藝，確定其最佳料液比為1∶10，蒸餾時間為4h。
　　2.通過初步分離后，得到石油醚部分、乙酸乙酯

3、部分、水相部分，測得藤椒水提液中黃酮含量為1.023 mg，乙酸乙酯相中黃酮含量為0.76 mg，黃酮得率為74.29％，水相的黃酮含量為為0.200 mg，得率為19.56％，石油醚相的黃酮含量為0.024 mg，得率為2.35％，乙酸乙酯相的黃酮得率在三種萃取部分中最高;在同一濃度下，還原力的大小強弱為:乙酸乙酯部分＞水相部分＞石油醚部分;通過相關(guān)關(guān)系分析，表明還原力與總黃酮含量之間具有顯著地相關(guān)性。
　　3.高效液相色譜法測

4、定乙酸乙酯部分、水相部分及水提液中的黃酮的含量，結(jié)果發(fā)現(xiàn)乙酸乙酯相的分離效果比較理想。乙酸乙酯部分中蘆丁、槲皮素、山奈酚、異鼠李素的平均含量分別為97μg/mL、3.02μg/mL、0.15μg/mL、0.4μg/mL。
　　4.以Vc為陽性對照，以還原力和羥自由基、DPPH、O2-·自由基清除率為評價指標(biāo)研究藤椒水提液的體外抗氧化活性。結(jié)果表明，藤椒水提液的還原能力、自由基清除率均隨其質(zhì)量濃度的增加而增強，雖然抗氧化活性弱于Vc

5、，但是仍具有一定的抗氧化活性。其中，4 mg/mL的藤椒水提液的還原力＜0.1 mg/mL的Vc的還原力＜5mg/mL的藤椒水提液的還原力;·OH的清除率方面，藤椒水提液和Vc的IC50值分別為7.65 mg/mL和0.68 mg/mL，當(dāng)藤椒水提液濃度達到20 mg/mL時，與0.8 mg/mL的Vc(61.15％)的清除率基本相當(dāng);DPPH自由基的清除方面，藤椒水提液和Vc的IC50值分別為7.94 mg/mL和0.006 mg/m

6、L，20 mg/mL藤椒水提液對DPPH自由基的清除效果與1 mg/mL的Vc(59.74％)基本相當(dāng);O2-·自由基清除方面，-Vc和藤椒水提液對O2-·的IC50值分別為0.4207 mg/mL、7.543 mg/mL，20 mg/mL的藤椒水提液的清除效果(70.3％)與1 mg/mL的Vc(70.54％)基本相當(dāng)。
　　5.通過抑菌圈大小、MIC、MBC分析藤椒水提液的抑菌能力測定分析，發(fā)現(xiàn)藤椒水提液的抑菌活性要弱于藤椒揮