半枝蓮等中藥有效化學(xué)成分的分離研究.pdf

1、科學(xué)技術(shù)的迅速發(fā)展推動了醫(yī)藥水平的進(jìn)步,同時對中藥的使用提出了更高的要求,通常一種中藥含有多種化學(xué)成分,而有效藥用成分可能僅僅是其中的一種或兩種,因此采用合理的方法對中藥化學(xué)成分分離純化極其重要。本文對中藥半枝蓮、射干、大豆異黃酮化學(xué)成分的分離純化方法進(jìn)行了優(yōu)化,從而建立了高效、簡單的純化方法。
　　一、半枝蓮黃酮類化合物分離純化的研究
　　本文建立了大量制備純度較高的半枝蓮黃酮類化合物單體的方法:運(yùn)用聚酰胺柱將成分復(fù)雜的粗

2、提取物進(jìn)行預(yù)分離,用PHPLC對分段后的各樣品純化制備得到單體。對提取方法、提取溶劑、提取溶劑的濃度、提取次數(shù)等提取工藝條件進(jìn)行了優(yōu)化,建立了最佳提取方法。提取后將浸膏裝入聚酰胺柱進(jìn)行初步分離,然后將初步分離的組分用PHPLC進(jìn)一步純化。所用PHPLC色譜柱為C18柱(400 mm×25.4 mm ID20 um),流動相為甲醇-水。從半枝蓮全草中分離純化出6個黃酮類化合物:芹菜素-5-O-β-D-葡萄糖苷、柚皮素、野黃芩素、木犀草素、

3、4′-羥基漢黃芩素、芹菜素,其純度分別為96.8％、95.6％、96.9％、99.4％、97.2％、98.4％,各化合物結(jié)構(gòu)利用核磁鑒定。
　　二、射干化學(xué)成分分離純化研究
　　建立了運(yùn)用硅膠柱色譜法和PHPLC對射干有效化學(xué)成分分離純化的方法。先用硅膠柱對射干化學(xué)成分進(jìn)行預(yù)分離,將初步純化后的組分用PHPLC進(jìn)一步純化得到純度較高的單體。所用PHPLC色譜柱為C18柱(400 mm×25.4 mm ID20 um),檢測波

4、長為296 nm,流動相為甲醇-水。得到了次野鳶尾黃素、野鳶尾黃素、野鳶尾苷元、茶葉花寧、3′,5′-二甲氧基尼鳶尾黃素-4′-O-β-葡萄糖苷、白藜蘆醇、鳶尾苷、野鳶尾苷8種化合物,各化合物的純度分別為95.9％、97.2％、92.1％、93.8％、98.9％、95.0％、93.4％、99.0％,各化合物結(jié)構(gòu)利用核磁鑒定。
　　三、大豆異黃酮純化研究
　　建立了運(yùn)用SOURCE15RPC作為制備型高效液相色譜的固定相、運(yùn)用

5、甲醇-0.1％磷酸作為流動相分離純化大豆中大豆異黃酮的方法。所用檢測波長為254 nm,流速為15 ml/min,進(jìn)樣量為5 ml,流動相(甲醇-0.1％磷酸)按照:0-10 min,45％甲醇;10-25 min,45％-95％甲醇的方式進(jìn)行梯度洗脫。經(jīng)純化從大豆提取物中得到大豆苷、黃豆黃苷、染料木苷、大豆苷元和染料木素這五種大豆異黃酮,其純度分別是98.6％、97.8％、99.3％、99.5％、99.1％,各化合物結(jié)構(gòu)利用核磁鑒定。