蒼艾揮發(fā)油對肺氣虛證大鼠免疫調(diào)節(jié)作用的研究.pdf

1、蒼艾揮發(fā)油是導(dǎo)師臨床效驗方基礎(chǔ)上提煉制成的揮發(fā)油復(fù)方制劑，前期研究表明蒼艾揮發(fā)油對金葡菌、甲型肺炎鏈球菌、乙型鏈球菌等AURI常見菌株有較為明顯的抑制作用，鼻腔吸入給藥能有效提高小鼠唾液中SIgA的含量，保護(hù)上呼吸道免受大氣中煙塵損害，預(yù)防上呼吸道感染。在上述理論和前期工作的基礎(chǔ)上，本課題針對蒼艾揮發(fā)油經(jīng)鼻和灌胃給藥對肺氣虛型大鼠免疫調(diào)節(jié)作用進(jìn)行了深入的實驗研究。
　　 目的：研究蒼艾揮發(fā)油對肺氣虛大鼠免疫功能的影響和作用機(jī)制，

2、以期為臨床使用相關(guān)藥物治療肺氣虛證提供指導(dǎo)。
　　 方法：⑴通過收集既往肺氣虛證動物模型造模方法資料，選擇兩種常用的肺氣虛證動物模型（即“簡易煙熏法”和“LPS+煙熏法”）進(jìn)行復(fù)制，并通過客觀診斷指標(biāo)的比較，從中篩選出敏感度高、重現(xiàn)性好的肺氣虛證動物模型。⑵研究蒼艾揮發(fā)油灌胃與經(jīng)鼻給藥兩種給藥方式對大鼠肺氣虛模型的免疫調(diào)節(jié)作用:復(fù)制大鼠肺氣虛模型并同時給予蒼艾揮發(fā)油，在造模完成后第31天，取出大鼠血清、肺臟和咽部組織，應(yīng)用ELI

3、SA法檢測大鼠血清中的IgE、TNF-α、IFN-γ、IL-1β的含量，應(yīng)用流式細(xì)胞技術(shù)測定T細(xì)胞亞群，對肺臟和咽部組織進(jìn)行病理形態(tài)學(xué)觀察。
　　 結(jié)果：①根據(jù)2002年《中藥臨床研究指導(dǎo)原則》肺氣虛證的診斷標(biāo)準(zhǔn)，簡易煙熏組和LPS+煙熏組與正常組相比較，肺氣虛的陽性癥狀和體征都非常明顯（P＜0.01），其中LPS+煙熏組的陽性癥狀和體征比簡易煙熏組更為顯著（P＜0.01);模型組咽部及肺組織病理改變較正常組明顯，簡易煙熏組和L

4、PS+煙熏組的肺組織病理切片，皆可見炎性細(xì)胞浸潤， LPS+煙熏組還出現(xiàn)了肺泡間隔增寬，肺大泡形成，小血管擴(kuò)張的病理改變。②模型組CD4+比例與正常對照組相比，明顯下降，具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，蒼艾揮發(fā)油灌胃給藥和滴鼻給藥能有效調(diào)節(jié)肺氣虛證大鼠全血中T淋巴細(xì)胞亞群的比例，使T淋巴細(xì)胞亞群的比例接近正常值。③模型組IFN-γ含量與正常對照組相比明顯降低(P＜0.05，P＜0.01);蒼艾揮發(fā)油灌胃及滴鼻的高、中劑量組與相應(yīng)模型組相

5、比， IFN-γ含量均有明顯升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）;④模型組IL-1β含量與正常對照組相比，明顯升高(P＜0.01，P＜0.05);蒼艾揮發(fā)油灌胃高、中、低劑量組與模型組相比，IL-1β含量均有降低，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）;蒼艾揮發(fā)油滴鼻高、中劑量組與模型組相比，IL-1β含量降低，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);⑤模型組TNF-α的含量與正常對照組相比，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05);蒼艾揮發(fā)油灌胃及

6、滴鼻的高、中、低劑量組與相應(yīng)模型組相比較，TNF-α的含量差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）;⑥模型組IgE的含量與正常對照組相比，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）;蒼艾揮發(fā)油灌胃及滴鼻的高、中、低劑量組與相應(yīng)模型組相比較，IgE的含量差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）;⑦病理切片觀察結(jié)果證實:蒼艾揮發(fā)油預(yù)防給藥滴鼻高、低劑量組和灌胃高、低劑量組咽部黏膜的炎癥細(xì)胞明顯較模型組減少，充血水腫的狀況也明顯減輕;通過肺組織的病理結(jié)果可看出，蒼

7、艾揮發(fā)油滴鼻高劑量組和灌胃高劑量組能有效地減少肺泡壁炎細(xì)胞的浸潤，改善肺組織的充血狀況，修復(fù)被破壞的黏膜組織。
　　 結(jié)論：⑴簡易煙熏模型組、LPS+煙熏模型組與正常對照組相比較，肺氣虛證陽性癥狀體征積分和肺部及咽部的病理改變均有顯著差異，說明造模成功。其中LPS+煙熏模型組與簡易煙熏模型組比較，肺氣虛證陽性癥狀更為明顯，并且LPS+煙熏模型組的病理切片較簡易煙熏模型組出現(xiàn)了肺氣腫的病理改變。LPS+煙熏組更符合肺氣虛證的診斷指