GPER對于兔耳增生性瘢痕作用的研究.pdf

1、目的:
　　1.通過局部應用雌素來觀察并驗證其對于兔耳增生性瘢痕的影響作用。
　　2.研究G蛋白偶聯(lián)雌激素受體(GPER)介導的雌激素快速非基因組效應對于兔耳增生性瘢痕的影響及作用機制。
　　方法：
　　選取3-6月齡新西蘭大耳兔，36只，體重2.5-3kg,雌性，要求兔耳皮膚完整無破損；適應性飼養(yǎng)7天后，在兔的單側耳腹面共做6個直徑為10mm的圓形創(chuàng)面，間距大于15mm,深達軟骨層并刮除軟骨膜，建立兔耳增生性瘢

2、痕模型。按照隨機數(shù)字表法將36只新西蘭大耳兔分為6個組，每組6只：(control組)為空白對照組；(DMSO組)為溶劑組；（E2組)為雌激素組；（G1組)為GPER激動劑組；（E2+G15組)為雌激素+GPER拮抗劑組；(G1+G15組)為GPER激動劑+拮抗劑組。于造模后第15天，4個給藥組分別用微量注射器在兔耳根部皮下注射E20.025mg/（kg·d）,G10.06mg/（kg·d），G150.06mg/（kg·d），溶劑組注射

3、經(jīng)PBS稀釋為10％的DMSO溶液，對照組不予任何處理。持續(xù)注射14天后，觀察各組瘢痕增生情況并取標本，對比各組瘢痕增生指數(shù)（SEI）、成纖維細胞（FB）、膠原纖維以及通過PCR檢測TGF-β1、collagen III、collagen I的表達量。
　　結果：
　　1.形態(tài)學觀察: E2組和G1組相對于空白對照組，瘢痕突出周圍正常皮膚更為明顯，顏色較深多為暗紅色，中央部最為厚實，質地較硬；E2+G15組和G1+G15組對

4、比E2組和G1組，瘢痕中央厚度明顯降低，顏色也較淺為粉紅色，部分與正常皮膚接近，質地明顯變軟；DMSO組相對于空白對照組瘢痕增生情況差別不大。
　　2.HE染色和MASSON染色觀察：E2組和G1組相對于空白對照組，瘢痕組織中存在大量的成纖維細胞，血管生長豐富，細胞外基質有大量沉積，膠原纖維多而粗大，排列紊亂。E2+G15組和G1+G15組對比E2組和G1組，成纖維細胞明顯減少，血管分布較少，細胞外基質沉積減少，膠原纖維也相對減少

5、，DMSO組相對于空白對照組膠原纖維、成纖維細胞和血管分布未見特殊異常。
　　3.瘢痕增生指數(shù)：E2組和G1組明顯高于空白對照組（P＜0.05），E2+G15組相對于E2組明顯降低（P＜0.05），G1+G15組相對于G1組也明顯降低（P＜0.05），而空白對照組和DMSO組無明顯差異（P＞0.05）。
　　4. RT-PCR檢測：與空白對照組相比，E2組和G1組的collagenⅠ、collagenⅢ、TGF-β1的mRN

6、A表達量明顯升高（P＜0.05）；而E2+G15組和G1+G15組分別對比E2組和G1組時，我們又發(fā)現(xiàn)collagenⅠ、collagenⅢ、TGF-β1的mRNA表達量明顯降低（P＜0.05）；DMSO組相對于空白對照組無明顯差異（P＞0.05）。
　　結論：
　　1.雌激素對于兔耳增生性瘢痕具有促進作用。
　　2.G蛋白偶聯(lián)雌激素受體（GPER）對于兔耳增生性瘢痕具有影響作用，激活GPER能夠促進兔耳增生性瘢痕的形