臨床蛋白質(zhì)組學(xué)在糖尿病腎病研究中的應(yīng)用.pdf

1、【目的】
　　糖尿病腎病發(fā)病機(jī)制至今未完全闡明，有助于早期診斷糖尿病腎病的生物學(xué)指標(biāo)仍然缺乏，如何預(yù)測糖尿病腎病的進(jìn)展也是難題。本研究嘗試應(yīng)用血清蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)，探索糖尿病腎病致病因子，尋找用于早期診斷糖尿病腎病和預(yù)測糖尿病腎病病情進(jìn)展的指標(biāo)。
　　【方法】
　　入選年齡、性別匹配研究對象分為4組，每組8個(gè)人，組A為正常對照組，組B、C、D分別為2型糖尿病尿白蛋白肌酐比（ACR）﹤30mg/g肌酐組、30mg/g肌酐≤

2、ACR﹤300mg/g肌酐組、ACR≥300mg/g肌酐組。收集空腹血清，蛋白定量后每組形成一血清池。去除白蛋白和去鹽后，每組以等量蛋白質(zhì)上樣。利用雙向電泳進(jìn)行蛋白質(zhì)分離后，銀染，掃描成像。實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。應(yīng)用ImageMaster2D Platinum分析軟件（GE公司）分析四組之間差異表達(dá)的蛋白質(zhì)點(diǎn)。挖取表達(dá)差異蛋白質(zhì)點(diǎn)，酶解后進(jìn)行基質(zhì)輔助激光解附離子化飛行時(shí)間質(zhì)譜（MALDI-TOF MS）分析，并與SwissProt數(shù)據(jù)庫進(jìn)行匹配

3、鑒定蛋白質(zhì)。
　　【結(jié)果】
　　四組血清經(jīng)過雙向電泳分離、染色、分析后，匹配蛋白點(diǎn)共有2119個(gè)。挖取11個(gè)差異表達(dá)蛋白質(zhì)點(diǎn)進(jìn)行質(zhì)譜分析，成功鑒定其中4個(gè)蛋白質(zhì)點(diǎn)。甘露糖結(jié)合凝集素相關(guān)絲氨酸蛋白酶2（MASP2）在組C表達(dá)明顯增高；前凝血酶原在組D表達(dá)明顯增高；血紅蛋白α亞單位、Igα1鏈 C區(qū)段在組D表達(dá)明顯增高。
　　【結(jié)論】
　　臨床蛋白質(zhì)組學(xué)可作為糖尿病腎病有效的研究手段。甘露糖結(jié)合凝集素相關(guān)絲氨酸蛋白酶