冬凌草種質資源研究.pdf

1、目的：為了掌握冬凌草種質資源多樣性的規(guī)律，明確不同地區(qū)、不同類型冬凌草質量上和遺傳關系的差異，為冬凌草藥用植物資源的保護、科學開發(fā)和合理利用提供科學依據(jù)。
　　 方法：采用高效液相色譜法對不同地區(qū)、不同類型冬凌草進行化學成分的含量測定：建立冬凌草二萜類成分指紋圖譜：采用ISSR分子標記對不同地區(qū)不同類型冬凌草的遺傳關系進行評價。
　　 結果：1、不同地區(qū)冬凌草質量評價對不同地區(qū)冬凌草中冬凌草甲素、冬凌草乙素、迷迭香酸、水

2、溶性浸出物、醚溶性浸出物含量進行測定。各種化學成分含量測定結果通過統(tǒng)計軟件SPSSl3 O進行聚類分析。聚類分析結果表明，不同地區(qū)冬凌草質量差異明顯，表現(xiàn)為地理分布相近的冬凌草質量上差別很大，而有些地理分布較遠的冬凌草可能由于生境近似，質量差別反而很小。其中影響冬凌草質量變化的主要因素是冬凌草甲素和乙素的含量。
　　 2、不同地區(qū)冬凌草二萜類成分指紋圖譜的研究對冬凌草二萜類物質的提取方法進行考察，以10批太行山所產(chǎn)冬凌草HPLC

3、色譜圖為參照，建立了冬凌草對照指紋圖譜。色譜條件為：色譜柱：phenomsil C18(250×4.6mm，5μm)柱；檢測波長： 238nm；流速；0 8ml/min；柱溫；30℃；流動相：甲醇：0 5％磷酸水溶液梯度洗脫：0.25min甲醇(45％-50％)；25-60min甲醇(52％)。結果表明，不同地區(qū)冬凌草二萜類成分差異明顯，不同變異類型冬凌草二萜類成分也發(fā)生了變化。
　　 3、不同地區(qū)冬凌草基因組DNA的提取與IS

4、SR分子標記通過對冬凌草基因組DNA的提取，進而對冬凌草基因組DNA樣品的ISSR-PCR條件進行優(yōu)化，從70條ISSR引物中篩選出5條進行擴增，建立了冬凌草ISSR指紋圖譜。通過對不同地區(qū)、不同變異類型冬凌草遺傳距離的計算，繪制冬凌草遺傳關系樹狀圖。結果表明，不同地區(qū)、不同變異類型冬凌草在基因上出現(xiàn)了明顯的分化。
　　 結論：結合對冬凌草質量的評價及二萜類成分的研究，可以明確冬凌草種質資源出現(xiàn)了多種分化，在臨床應用、工業(yè)生產(chǎn)及