慢性頭痛模型大鼠中紋狀體邊緣區(qū)的相關研究.pdf

1、目的:近來越來越多的研究表明紋狀體內的部分神經核團在痛覺傳導和調節(jié)過程中發(fā)揮著重要的作用，參與了許多急慢性疼痛類疾病的發(fā)病過程。紋狀體邊緣區(qū)(marginal division of striatum，MrD)是由我國學者首先發(fā)現的紋狀體內的功能新區(qū)。既往的研究發(fā)現MrD內富含傷害性刺激神經元和與疼痛傳導與調節(jié)密切相關的P物質。近來國內學者陳志曄等對1例左側殼核軟化灶導致右側軀體偏身疼痛的患者行靜息態(tài)磁共振腦功能成像研究，發(fā)現患者左側邊

2、緣區(qū)功能連接較健康對照顯著下降，提示邊緣區(qū)可能參與人類疼痛調節(jié)。本研究基于以上證據，通過炎癥湯反復刺激大鼠上矢狀竇硬腦膜引發(fā)大鼠無菌性硬腦膜炎癥，建立模擬慢性偏頭痛(chronic migraine，CM)大鼠模型，觀察CM模型大鼠MrD區(qū)神經元形態(tài)和數量的變化以及P物質表達量的變化。另外通過單純損毀單側或雙側大鼠的MrD區(qū)以及單側或雙側損毀CM模型大鼠的MrD區(qū)，探究損毀MrD后CM模型大鼠的痛覺閾值和行為學是否發(fā)生改變，以明確MrD

3、區(qū)在大鼠CM疾病過程中的作用。
　　方法:1.雄性SD大鼠72只(220-250g)，隨機分成6組:生理鹽水對照組(n=12)、CM造模組(n=12)、CM造模+雙側損毀組(n=12)、CM造模+單側損毀組(n=12)、單純雙側損毀組(n=12)和單純單側損毀組(n=12)。通過微量注射器向大鼠硬腦膜注射炎癥湯行模擬慢性偏頭痛造模，通過立體定位技術向大鼠腦MrD區(qū)注射海人藻酸進行損毀。
　　2.通過Von Frey纖維絲測量

4、大鼠眶周皮膚的痛覺閾值變化，并以此反應大鼠的痛覺敏感性變化。通過觀察大鼠的行為學變化評估大鼠頭痛程度是否發(fā)生改變。
　　3.對大鼠MrD區(qū)行尼氏染色，觀察MrD區(qū)形態(tài)學改變。用免疫組化方法測量大鼠MrD區(qū)P物質表達情況的變化。
　　4.用免疫組化方法，對大鼠中腦導水管周圍灰質區(qū)行c-fos染色，對不同組別的c-fos陽性表達數進行定量分析。
　　結果:1.大鼠眶周皮膚痛覺閾值測量結果顯示，生理鹽水對照組大鼠痛覺閾值無明

5、顯變化;與生理鹽水對照組相比，偏頭痛造模組、偏頭痛造模+雙側損毀組和偏頭痛造模+單側損毀組大鼠的痛覺閾值明顯降低(P＜0.05)，但三組之間沒有明顯差異(P＞0.05);單純雙側損毀組和單純單側損毀組的痛覺閾值沒有明顯差異(P＞0.05)。
　　2.大鼠行為學分析結果顯示，與生理鹽水對照組相比，偏頭痛造模組、偏頭痛造模+雙側損毀組和偏頭痛造模+單側損毀組大鼠的單側理毛行為和休息行為時間明顯增加(P＜0.05)而探索行為時間明顯減少

6、(P＜0.05);單純雙側損毀組和單純單側損毀組大鼠的各項行為時間沒有顯著差異(P＞0.05)。
　　3.尼氏染色結果顯示，偏頭痛造模組大鼠MrD區(qū)梭形細胞數目與生理鹽水對照組相比沒有明顯差異(P＞0.05)，細胞形態(tài)沒有發(fā)生改變。
　　4.P物質免疫組化染色結果顯示，偏頭痛造模組和偏頭痛造模+單側損毀組大鼠的未損毀側MrD內P物質含量明顯高于生理鹽水對照組(P＜0.05);偏頭痛造模+雙側損毀組、單純雙側損毀組以及偏頭痛造

7、模+單側損毀組和單純單側損毀組大鼠的損毀側MrD內P物質含量明顯低于生理鹽水對照組(P＜0.05)，單純單側損毀組的未損毀側MrD內P物質含量與生理鹽水對照組間沒有明顯差異(P＞0.05)。
　　5.C-fos免疫組化染色結果顯示，偏頭痛造模組、偏頭痛造模+雙側損毀組和偏頭痛造模+單側損毀組PAG區(qū)c-fos陽性細胞數明顯多于生理鹽水對照組、雙側損毀組和單側損毀組。提示本實驗對大鼠行硬腦膜炎癥湯灌注致慢性偏頭痛模型造模成功。