楊扇舟蛾實(shí)驗(yàn)種群對(duì)轉(zhuǎn)Bt基因楊樹(shù)抗性的研究.pdf

1、以楊扇舟蛾(Closteraanachoreta)幼蟲(chóng)為實(shí)驗(yàn)材料,應(yīng)用F2代篩選法,在不同轉(zhuǎn)Bt基因楊樹(shù)葉片(CK、Pb17、Pb29)脅迫下,建立了抗轉(zhuǎn)Bt基因楊樹(shù)的楊扇舟蛾實(shí)驗(yàn)種群。測(cè)定了不同Bt濃度脅迫篩選出的楊扇舟蛾實(shí)驗(yàn)種群的死亡率和蟲(chóng)內(nèi)BtCrv1Ab/1Ac含量。因用SSR分子標(biāo)記方法,對(duì)不同Bt表達(dá)量葉片飼養(yǎng)的楊扇舟蛾實(shí)驗(yàn)種群進(jìn)行了分析,從DNA水平分析了實(shí)驗(yàn)種群的遺傳結(jié)構(gòu)、遺傳多樣性和遺傳分化揭示了在轉(zhuǎn)Bt基因楊樹(shù)脅迫下

2、,楊扇舟蛾實(shí)驗(yàn)種群的抗性機(jī)制。主要研究結(jié)果如下:
　　 1.F2代篩選法可以快速有效地監(jiān)測(cè)害蟲(chóng)對(duì)Bt的抗性,經(jīng)室內(nèi)篩選獲得對(duì)轉(zhuǎn)Bt基因楊樹(shù)有抗性的楊扇舟蛾(ClosteraAnachoreta)實(shí)驗(yàn)種群即L-CK、L-Pb17、L-Pb29、D-CK、D-Pbl7、D-Pb29。
　　 2.在相同Bt濃度脅迫下,楊扇舟蛾實(shí)驗(yàn)種群幼蟲(chóng)1齡期死亡率最高,4齡時(shí)期死亡率最低,死亡率水平由高至低依次是1齡＞2齡＞3齡＞4齡,表明

3、楊扇舟蛾實(shí)驗(yàn)種群死亡率隨著齡期增長(zhǎng)而降低即隨著齡期增長(zhǎng)昆蟲(chóng)對(duì)Bt抗性增強(qiáng);在不同Bt濃度脅迫下,楊扇舟蛾實(shí)驗(yàn)種群死亡率,用Pb29轉(zhuǎn)基因楊樹(shù)葉飼養(yǎng)的楊扇舟蛾實(shí)驗(yàn)種群死亡率最高,對(duì)照毛白楊飼養(yǎng)的楊扇舟蛾實(shí)驗(yàn)種群死亡率最低,死亡率水平由高至低依次是Pb29＞Pb17＞CK,表明楊扇舟蛾實(shí)驗(yàn)種群死亡率隨著B(niǎo)t濃度的升高而升高。
　　 3.在不同Bt濃度脅迫下,用Pb29楊樹(shù)葉飼養(yǎng)的楊扇舟蛾實(shí)驗(yàn)種群體內(nèi)BtCry1Ab/1Ac含量高,而

4、用Pb17楊樹(shù)葉飼養(yǎng)的楊扇舟蛾實(shí)驗(yàn)種群體內(nèi)BtCry1Ab/1Ac含量較低,表明隨著B(niǎo)t濃度的升高楊扇舟蛾實(shí)驗(yàn)種群蟲(chóng)體內(nèi)BtCry1Ab/1Ac盼含量也升高;在相同Bt濃度脅迫下,楊扇舟蛾蟲(chóng)體死亡蟲(chóng)體和存活蟲(chóng)體內(nèi)BtCry1Ab/1Ac含量差異不顯著,L-17實(shí)驗(yàn)種群BtCry1Ab/1Ac含量與D-17實(shí)驗(yàn)種群BtCry1Ab/1Ac含量相當(dāng),L-29實(shí)驗(yàn)種群BtCry1Ab/1Ac含量與D-29實(shí)驗(yàn)種群BtCry1Ab/1Ac含量相

5、當(dāng),表明蟲(chóng)體內(nèi)BtCry1Ab/1Ac含量的多少與蟲(chóng)體飼養(yǎng)時(shí)間長(zhǎng)短無(wú)關(guān)。
　　 4.利用SSR分子標(biāo)記技術(shù),篩選出10對(duì)適合進(jìn)行楊扇舟蛾遺傳分析的引物,在6個(gè)楊扇舟蛾實(shí)驗(yàn)種群中共檢測(cè)到68條等位基因,位點(diǎn)平均等位基因數(shù)為6.8,平均多態(tài)位點(diǎn)百分率達(dá)96.67％。各實(shí)驗(yàn)種群內(nèi)平均有效等位基因數(shù)(Ne)為2.2399,平均期望雜合度(He)為0.5167,說(shuō)明各實(shí)驗(yàn)種群的遺傳多樣性較高。各實(shí)驗(yàn)種群的遺傳多樣性由高至低依次為D-Pb2

6、9＞L-Pb17＞D-Pb17＞L-Pb29＞D-對(duì)照＞L-對(duì)照,表明轉(zhuǎn)基因楊樹(shù)對(duì)楊扇舟蛾實(shí)驗(yàn)種群的遺傳多樣性具有明顯影響。
　　 5.實(shí)驗(yàn)種群間的遺傳分化系數(shù)(FsT)平均值為0.28,說(shuō)明各實(shí)驗(yàn)種群內(nèi)變異是楊扇舟蛾分化的主要來(lái)源,利用UPGMA方法聚類分析發(fā)現(xiàn),6個(gè)實(shí)驗(yàn)種群被分為3類即L-對(duì)照和D-對(duì)照聚為一類,L-Pb29和L-Pbl7聚為一類,D-Pb29和D-Pb17聚為一類。研究結(jié)果表明轉(zhuǎn)Bt基因楊樹(shù)對(duì)楊扇舟蛾實(shí)驗(yàn)種