鉛鎘聯(lián)合對(duì)大鼠肝臟的毒性損傷及α-硫辛酸的保護(hù)作用.pdf

1、為探討鉛鎘聯(lián)合對(duì)大鼠肝臟的毒性作用及α-硫辛酸的保護(hù)機(jī)制，本研究選用100g清潔級(jí)近交系雌性SD大鼠。預(yù)飼1周后，隨機(jī)分為8組:對(duì)照組(Control)、Pb組(300mg PbAc2/L)、Cd組(50mg CdAc2/L)、Pb+Cd組(300mg PbAc2/L+50mg CdAc2/L)、Pb+α-LA組(300mg PbAc2/L+α-LA)、Cd+α-LA(50mg CdAc2/L+α-LA)組、Pb+Cd+α-LA(300

2、mg PbAc2/L+50mg CdAc2/L+α-LA)組、α-LA組，每組6只，各組大鼠分別獨(dú)籠飼養(yǎng)。自由采食常規(guī)商品顆粒飼料，對(duì)照組自由飲用超純水，染毒組自由飲用配制毒液，α-硫辛酸按照每千克體重50mg的劑量灌胃，連續(xù)處理12周。結(jié)束后進(jìn)行如下操作:①麻醉后處死大鼠，稱(chēng)量各組大鼠體重及肝臟重量，計(jì)算其肝臟臟器系數(shù)變化;②測(cè)定肝臟組織中Cd、Pb、Cu、Fe、Zn和Mn的含量及抗氧化酶的活性和含量;③采用光學(xué)顯微鏡、透射電子顯微鏡

3、觀察大鼠肝組織病理學(xué)及超微結(jié)構(gòu)變化;④采用熒光定量PCR法及蛋白免疫印跡法檢測(cè)大鼠肝臟組織中自噬相關(guān)基因和蛋白的變化。
　　結(jié)果表明:①與對(duì)照組相比，各染毒組肝臟臟器系數(shù)均下降，其中Pb組和Pb+Cd組顯著下降(P＜0.05);與各染毒組相比，添加α-LA后，肝臟臟器系數(shù)極顯著上升(P＜0.01);②與對(duì)照組相比，Cd組和Pb+Cd組的Cd含量極顯著增加(P＜0.01);添加α-LA組與各染毒組比，鎘含量又極顯著減少(P＜0.01

4、);其他組與對(duì)照組相比，鎘含量變化不顯著(P＞0.05)。與對(duì)照組比較，Pb組和Pb+Cd組鉛含量極顯著增加(P＜0.01);添加α-LA后與各染毒組比，鉛含量極顯著減少(P＜0.01);其他組與對(duì)照組相比，鎘含量變化不顯著(P＞0.05);③光鏡結(jié)果顯示，各染毒組肝臟組織的大部分細(xì)胞核固縮、碎裂，且部分溶解;添加α-LA組與各染毒組相比，細(xì)胞形態(tài)得到顯著改善。電鏡結(jié)果顯示，對(duì)照組肝臟細(xì)胞核形呈圓形或卵圓形、染色質(zhì)分布均勻，線粒體豐富、

5、線粒體嵴清晰;鉛鎘暴露后細(xì)胞核染色質(zhì)分布不均，細(xì)胞核濃染、固縮，線粒體腫脹，線粒體嵴模糊，斷裂乃至崩解，部分形成空泡;添加α-LA可明顯減輕鉛鎘對(duì)大鼠肝臟細(xì)胞核和線粒體的損傷;④與對(duì)照組相比，Pb組、Cd組及鉛鎘聯(lián)合組肝臟組織Mn、Cu和Zn含量均極顯著增加(P＜0.01)，Cd組及鉛鎘聯(lián)合組中Fe含量極顯著減少(P＜0.01)，Pb組無(wú)顯著變化(P＞0.05);⑤與對(duì)照組相比，Cd組、Pb組和鉛鎘聯(lián)合組CAT活性顯著或極顯著升高(P＜

6、0.05或P＜0.01);Cd組和鉛鎘聯(lián)合組GSH含量極顯著升高(P＜0.01)，Pb組沒(méi)有顯著性變化(P＞0.05);Cd組、Pb組和鉛鎘聯(lián)合組SOD活性沒(méi)有顯著性變化(P＞0.05);⑥與對(duì)照組相比，各染毒組自噬相關(guān)基因Atg7、Atg5、Beclin-1和LC3的mRNA表達(dá)均升高(P＜0.05或P＜0.01)，但單獨(dú)染毒組與聯(lián)合染毒組沒(méi)有顯著差異(P＞0.05);各染毒組自噬相關(guān)蛋白表達(dá)與對(duì)照組相比均顯著升高（P＜0.05或P＜