超順磁性異煙肼PELA微球體內(nèi)外釋放及其安全性評(píng)價(jià)的初步研究.pdf

1、研究目的：
　　 1.制備超順磁性異煙肼聚乳酸-聚乙二醇共聚物(PELA)微球(superparamagnetic isoniazide Polylactide-polyethylene glycolcopolymers microspheres,spIPM)及研究其在振蕩磁場(chǎng)作用下體外釋放情況。
　　 2.研究超順磁性異煙肼PELA微球在振蕩磁場(chǎng)作用下動(dòng)物體內(nèi)異煙肼的釋放規(guī)律。
　　 3.初步研究超順磁性異煙肼

2、PELA微球的安全性:超順磁性Fe3O4納米粒(superparamagnetic Fe3O4 nanoparticle,SPFN)對(duì)小鼠的急性毒性作用。
　　 研究方法：
　　 1.采用正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化的復(fù)乳化(W/O/W)溶劑揮發(fā)法制備超順磁性異煙肼PELA微球。采用了紫外分光光度法測(cè)定spIPM的包封率和載藥量。采用小杯法測(cè)定體外微球中異煙肼釋放情況,分組方法如下,A組:超順磁性異煙肼PELA微球;B組:超順磁性異煙肼

3、PELA微球;C組:異煙肼PELA微球。A、C兩組在每次取樣前30min用振蕩磁場(chǎng)干擾15min,B組始終不用振蕩磁場(chǎng)干擾。
　　 2.采用復(fù)乳化(W/O/W)溶劑揮發(fā)法制備spIPM,選取18只新西蘭大白兔,隨機(jī)分為spIPM外加振蕩磁場(chǎng)干預(yù)組,spIPM組和異煙肼溶液組,對(duì)這3組分別進(jìn)行肌肉注射。每隔15分鐘取靜脈血,用高效液相色譜法(High performance Liquid Chromatography,HPLC)測(cè)

4、定異煙肼的血藥濃度,比較這3組兔血中異煙肼的釋放情況。
　　 3.采用化學(xué)共沉淀法制備SPFN,應(yīng)用透射電鏡和振動(dòng)樣品磁場(chǎng)計(jì)等對(duì)SPFN進(jìn)行形態(tài)觀察和結(jié)構(gòu)表征測(cè)定。取60只小鼠按不同的給藥方式和劑量,隨機(jī)數(shù)字表法分為3組(n=20):口服灌胃組(總劑量:2104.8 mg/kg、容積:25 ml/kg),腹腔注射組(總劑量:1578.6mg/kg、容積:20ml/kg),尾靜脈注射組(總劑量:438.5 mg/kg、容積:10

5、ml/kg);每組另取10只小鼠予生理鹽水作為對(duì)照(n=10)。觀察小鼠的一般情況;全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)小鼠主要血生化指標(biāo);HE染色觀察主要臟器的病理改變;瑞氏染色觀察骨髓組織。
　　 結(jié)果:
　　 1.超順磁性的A組微球在振蕩磁場(chǎng)的干擾下異煙肼的釋放明顯高于無(wú)振蕩磁場(chǎng)干預(yù)的超順磁性的B組微球中異煙肼的釋放。在相同振蕩磁場(chǎng)的干擾下,超順磁性的A組微球中異煙肼釋放明顯高于C組非磁性微球中異煙肼的釋放。
　　 2.與

6、單純注射異煙肼相比,spIPM能延緩異煙肼釋放,外加振蕩磁場(chǎng)時(shí),可重復(fù)提高動(dòng)物體內(nèi)spIPM中異煙肼的釋放量。
　　 3.制成的粒徑大小為15～20 nm,飽和磁化強(qiáng)度為21.431 emu/g,剩余磁化強(qiáng)度為0.1016 emu/g的SPFN,予SPFN2周后,各組小鼠均未死亡,血生化指標(biāo)均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05),主要臟器和骨髓均未見炎癥、水腫、變性、壞死等改變。
　　 結(jié)論:
　　 1.體外釋放中,異煙