樹枝狀高聚物聚酰胺-胺對葛根素眼部藥物動力學(xué)的影響研究.pdf

1、樹枝狀高聚物聚酰胺-胺（Polyamidoamine, PAMAM）為近年來開發(fā)的一類三維的高度支化的樹枝狀高分子，具有單一分散性，無免疫原性，細胞毒性較低，生物可降解等特性，作為藥物載體能夠增加藥物皮膚滲透系數(shù)，延長角膜滯留時間，從而增加藥物的生物利用度，課題組前期研究表明PAMAM 可以增加葛根素離體角膜滲透性。是一種頗具發(fā)展?jié)摿Φ男滦脱鄄克幬镙d體。
　　 微滲析（microdialysis）技術(shù)是近年來開發(fā)的一種以透析原理

2、為基礎(chǔ)，在組織細胞間隙測定內(nèi)源性和外源性物質(zhì)的在體取樣技術(shù)。該技術(shù)具有大量實驗動物模型無可匹敵的優(yōu)點。例如，微滲析技術(shù)對動物組織的損傷?。皇沟猛瑫r在同一動物體內(nèi)監(jiān)測靶組織和血液藥物濃度成為可能；自身做對照,減少了實驗誤差及實驗動物數(shù)；具有連續(xù)、不間斷取樣特性,真正做到了對組織中的藥物進行實時監(jiān)測等。已經(jīng)在藥代動力學(xué)研究方面得到廣泛的應(yīng)用。
　　 本論文以葛根素（Puerarin, PUE）為模型藥物，建立兔眼部微滲析模型，采用L

3、C-MS/MS 檢測方法，考察了不同代數(shù)的PAMAM對于PUE 眼部吸收的影響，為PAMAM 成為眼部藥物給藥載體提供依據(jù)。
　　 一、建立了基于MAB/3 型探針的兔眼部微滲析模型，并對探針體內(nèi)外回收率進行考察，探針體內(nèi)外回收率分別為（16.25±1.13）％、（30.16±0.49）％。建立了眼部房水中PUE 測定的LC-MS/MS 檢測方法，優(yōu)化的質(zhì)譜條件為ESi離子源；負離子掃描模式，選擇離子監(jiān)測方式；多反應(yīng)檢測；色譜柱

4、：C18，（Phenomenex Luna，150mm×2.1mm I.d.，5 μm）；流動相：乙腈-0.2 mmol·L-1醋酸銨水溶液（40:60）；流速：0.2 Ml·min-1；運行時間：5min；噴霧電壓：3.0Kv；毛細管溫度：350℃；鞘氣壓：30kPa；輔助氣流速：5 arb；碰撞電壓：25 Ev；m/z 415.0摯瑬敳獩 295.0（葛根素），m/z 449.1摯瑬敳獩 285.0（落新婦苷，內(nèi)標(biāo)）。使用Xcali

5、burversion 1.4.1軟件處理數(shù)據(jù)。葛根素在兔房水滲析液中標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍為2～1000ng·Ml-1，最低定量限為2 ng·Ml-1，方法提取回收率為79％～86％，低、中、高三個濃度（2，50，1000ng·Ml-1）的日內(nèi)和日間精密度（RSD）均小于10％。方法專屬性好，靈敏度高，因此本方法滿足滲析液樣品測定要求，可用于葛根素的眼部藥代動力學(xué)研究。
　　 二、采用建立的兔眼部微滲析模型，分別考察了PUE（1％，

6、w/v）及不同代數(shù)PAMAM （0.2％，w/v）與PUE 混合后的眼部藥物動力學(xué)。結(jié)果表明G3.0，G4.0，G5.0PAMAM-PUE 混合組葛根素的藥-時曲線下面積分別為PUE組的2.3，3.5，2.1倍，峰濃度分別為PUE的1.5, 2.5和1.3倍，達峰時間也延長。提示隨著PAMAM代數(shù)的增加，葛根素的房水峰濃度和相對生物利用度也明顯增高。但是G5.0PAMAM-PUE 混合組卻較G3.0，G4.0PAMAM-PUE 混合組低