非酒精性脂肪性肝炎腸組織MIF和MMP-2表達(dá)的研究.pdf

1、目的：采用高脂飲食及腹腔注射氧四環(huán)素建立大鼠非酒精性脂肪性肝炎（non-alcoholicsteatohepatitis, NASH）模型，觀察并檢測(cè)甘氨酸在非酒精性脂肪性肝炎（non-alcoholicsteatohepatitis, NASH）發(fā)生發(fā)展過(guò)程中對(duì)腸組織巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子（MIF）和基質(zhì)金屬蛋白-2 （MMP-2）表達(dá)的影響，探討腸源性內(nèi)毒素血癥（IETM）與腸免疫屏障的關(guān)系及其在非酒精性脂肪型肝炎發(fā)生發(fā)展過(guò)程中的作用

2、。
　　 方法：選用雄性SD大鼠36只，清潔級(jí)，環(huán)境溫度適宜，自由飲食，自然光照,適應(yīng)性飼養(yǎng)一周后隨機(jī)分成三組,每組12只:①模型組：（普通飼料、 15％豬油、2％膽固醇、0.5％膽酸鈉、5％蛋黃粉），每五天按10mg/100g 劑量給予氧四環(huán)素（每1ml 針劑含氧四環(huán)素20mg）腹腔注射②對(duì)照組:（普通飼料喂養(yǎng)），在模型組注射氧四環(huán)素的同一時(shí)間，給予相同體積的生理鹽水腹腔注射③治療組:（普通飼料、15％豬油、2％膽固醇、0.5

3、％膽酸鈉、5％蛋黃粉、5％甘氨酸），并每五天按10mg/100g 劑量給予氧四環(huán)素（每1ml 針劑含氧四環(huán)素20mg）腹腔注射，于第4,8周末分別從上述三組中取6只大鼠處死，測(cè)量體重和肝重，計(jì)算肝指數(shù)；取肝臟標(biāo)本做HE 染色、觀察肝臟的形態(tài)學(xué)變化；按照實(shí)驗(yàn)要求采集腹主動(dòng)脈血檢測(cè)血漿中腫瘤壞死因子-α、轉(zhuǎn)氨酶(ALT、AST)、白介素-6、白介素-10和門靜脈血漿內(nèi)毒素(ET)水平；應(yīng)用免疫組化的方法檢測(cè)同期模型組與對(duì)照組、治療組與模型組

4、腸組織中MIF和MMP-2表達(dá)的變化。
　　 結(jié)果：（1）各組大鼠體重均呈進(jìn)行性升高，模型組肝指數(shù)、大鼠體重均高于同期對(duì)照組(P<0.05)，并隨時(shí)間的延長(zhǎng)呈升高趨勢(shì)；（2）4周時(shí)模型組與同期對(duì)照組相比ALT與AST 明顯升高（P<0.05），治療組均明顯低于同期模型組（P<0.05）；（3）4周起與同期對(duì)照組相比，模型組大鼠TNF-α，ET 均有升高（P<0.05），8周治療組大鼠TNF-α和ET與同期模型組比較明顯降低（P<

5、0.05）；（4）8周時(shí)模型組大鼠與對(duì)照組相比IL-6 明顯升高（P<0.05），治療組明顯低于同期模型組（P<0.05）；4周起模型組IL-10開(kāi)始降低，且與對(duì)照組相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；（5）免疫組化結(jié)果顯示模型組腸組織MIF、MMP-2的表達(dá)量與同期對(duì)照組相比均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05）；治療組MIF、MMP-2的表達(dá)量與同期模型組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；（6）直線相關(guān)分析結(jié)果：TNF α與門靜脈血ET 相關(guān)性分析

6、：呈高度正相關(guān)(P<0.01)；MIF、MMP-2與門靜脈血ET 相關(guān)性分析：呈正相關(guān) (P<0.01)；MIF與MMP-2 相關(guān)性分析：呈高度正相關(guān)(P<0.01)。
　　 結(jié)論：1、在采用高脂飲食及腹腔注射氧四環(huán)素制備大鼠NASH 模型中伴有IETM的形成。2、ET水平的增高與腸組織MIF及MMP-2表達(dá)增高呈正相關(guān)，可能提示IETM的形成與腸免疫屏障受損有關(guān);3、甘氨酸可拮抗內(nèi)毒素，降低了腸組織MIF和MMP-2的表達(dá)，減