貝沙羅汀對腦缺血再灌注大鼠血腦屏障的保護作用及其機制研究.pdf

1、第一部分:貝沙羅汀對腦缺血大鼠血腦屏障通透性的影響
　　目的：由于已有研究證實維甲酸X受體激動劑貝沙羅汀能提高腦組織中apoE（apolipoprotein E）水平，且apoE對BBB有一定的保護作用，因此本部分內容將研究貝沙羅汀對CIR（Cerebral ischemia/reperfusion，CIR）引起的大鼠血腦屏障（Blood-brain barrier，BBB）損傷是否有保護作用。
　　方法：180只大鼠，隨機

2、分為三組，每組60只，分為：假手術組、CIR組和CIR+貝沙羅汀組。各組于CIR后12h、24h、48h和72h，干濕重法測量腦含水量；EB（Evans blue）法和加強MRI檢測BBB通透性；WB法檢測主要的緊密連接蛋白claudin-5和occludin的表達情況。
　　結果：與CIR組相比，CIR+貝沙羅汀組于CIR后24h，48h和72h，（1）大鼠腦水含量顯著降低（P<0.01）；（2）腦組織中EB含量及MRI信號強度

3、顯著降低（P<0.01）；（3）緊密連接蛋白claudin-5和occludin的表達顯著增加（P<0.01）。
　　結論：貝沙羅汀降低了CIR大鼠BBB的通透性，減輕了腦水腫，抑制了重要的緊密連接蛋白claudin-5和occludin的降解，。這個研究對開發(fā)新作用靶點的CIR治療藥物有著重要的意義。
　　第二部分:貝沙羅汀對腦缺血大鼠血腦屏障保護作用的機制研究
　　目的：評價貝沙羅汀對CIR大鼠腦組織中apoE、基

4、質金屬蛋白酶-9（Matrix metalloproteinase-9,MMP-9）及氨基末端蛋白激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)信號通路的影響。
　　方法：100只大鼠隨機分為四組：假手術組、CIR組、CIR+SP600125組和CIR+貝沙羅汀組，每組25只。各組于CIR后12h、24h、48h和72h時間點，每組取5只，迅速斷頭取腦，WB法檢測apoE、MMP-9、p-JNK及JNK蛋白的表達情

5、況，RT-PCR法檢測MMP-9mRNA表達情況；明膠酶譜法檢測MMP-9酶活性。
　　結果：與CIR組相比，CIR+貝沙羅汀組于CIR后24h，48h和72h，腦組織中apoE蛋白表達增加（P<0.01）；MMP-9的mRNA、蛋白及活性顯著降低（P<0.05，P<0.01）；p-JNK及JNK蛋白的表達顯著降低（P<0.05，P<0.01）。CIR后24h，48h和72h，CIR+貝沙羅汀組與CIR+SP600125組MMP-