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1、西南師范大學(xué)碩士學(xué)位論文人工繁殖南方鲇性別決定與分化相關(guān)因子的初步研究姓名:張修月申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):水生生物學(xué)指導(dǎo)教師:王德壽20050401理學(xué)硪士學(xué)位論文:人工繁殖南方懿餓別決定與分化襁關(guān)西子的搦疹研究變誘發(fā)了南方鲇的雌核發(fā)育或在干法授精中商濃度的卵巢液物質(zhì),特別是酸性物質(zhì)是否酸菇了含有Y燙色體戇穗予鼴囂導(dǎo)致了懣方鰱麴全壤豫,本諺究懣露了毒方鰱受精細(xì)胞學(xué)觀察和稀釋卵巢液物質(zhì)濕法授精實(shí)驗(yàn)。使用嘉陵敬江水將剮擠出的成熟良好的南方鲇
2、卵子殿卵巢液物質(zhì)分別稀釋2儲、5糖、00薅蓐逡紛浸法授穰,幼魚飼養(yǎng)至孵鼗蓐130d酲遴行經(jīng)愛鑒定,沒發(fā)瑗雄憊,該實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,原人工繁殖中采用的干法授精不是造成南方鲇人工繁殖后代全雌化的主要因素。遴逮在17℃秘24℃隸瀑條襻下受禧靜態(tài)方鰱受精綏穩(wěn)學(xué)蕊察表秘,在17℃瓣條件下,精子約在鼴精后20s進(jìn)入卵子細(xì)胞質(zhì),約在受精屆25rain形成雄性原核,卵予約在受精后20min左右形成第二極體,并排出體外,雌性原核約在受糟后25min友蔭影藏,
3、鼴雄琢棱縫在受精屠4045min囂始接魅蒡部分融合,鮑在受糖螽50min,羧雄原核完全融合形成合子核。24℃條件下除了雌雄原核的形成和融合時間要早一贍外,其它受精細(xì)胞學(xué)程序與17℃基本一樣,遮表明,人工煞殖南方鲇具有正常的受精綴麓學(xué)程彥,入誓繁建毫方熬戇全避詫苓跫痰專:鰱菝發(fā)鴦簿致夔。為了進(jìn)一拶探索南方鲇性別分化的機(jī)制,研究了性腺分化早期促性腺激索(gonadotropinhormone,GtH)在南方鲇脯疆體的表達(dá)。用RT—PCR的方
4、法克隆了南方懿G疆a(chǎn)受驀、FSH多妥蘩耨LH?;鵦DNAs(三個黢基cDNA靜羧營酸旁捌濺提交GenBank熊序列號為,0tHsubunitaAY973舛5;LHsubunit罄:AY973946;FSHsubunit8:AY973947)。采用半定量RTPCR的方i蠢測定了南方鲇性腺分化早期GtH靜表達(dá),縫栗表鞠GtH在往來勢建褻裁毒表這,程毪裂勢純貔笑鍵跨蘩表達(dá)上調(diào)。這說明GtH在南方鲇性剮分化中可能嶷有重要作用,環(huán)境對南方鲇性別分
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