應(yīng)用酯酶和過(guò)氧化物酶同工酶電泳技術(shù)進(jìn)行香菇品種鑒定的研究.pdf

1、沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文應(yīng)用酯酶和過(guò)氧化物酶同工酶電泳技術(shù)進(jìn)行香菇品種鑒定的研究姓名：王翠艷申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：蔬菜學(xué)指導(dǎo)教師：何莉莉20060610沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文摘要在香菇菌株鑒別中曾經(jīng)使用的技術(shù)有形態(tài)學(xué)鑒定、拮抗、同工酶、分子生物學(xué)手段等，它們各有優(yōu)缺點(diǎn)。相比而言，同工酶技術(shù)由于實(shí)驗(yàn)條件要求簡(jiǎn)單，樣品取材方便，容易出實(shí)驗(yàn)結(jié)果等優(yōu)點(diǎn)而得到廣泛應(yīng)用。但同工酶電泳結(jié)果的重現(xiàn)性易受凝膠系統(tǒng)、染色等技術(shù)指標(biāo)的影響。本研究的目的是

2、對(duì)香菇酯酶、過(guò)氧化物酶同工酶進(jìn)行聚丙烯酰胺凝膠電泳技術(shù)指標(biāo)篩選，并將篩選出的指標(biāo)應(yīng)用于香菇品種鑒定和雜交優(yōu)勢(shì)預(yù)測(cè)。同時(shí)本文通過(guò)農(nóng)藝性狀對(duì)香菇品種進(jìn)行了鑒定，并將農(nóng)藝性狀鑒定的結(jié)果與同工酶鑒定的結(jié)果進(jìn)行了比較。研究結(jié)果如下：一、香菇品種同工酶鑒定技術(shù)指標(biāo)的篩選結(jié)果(一)電泳凝膠濃度的篩選結(jié)果濃縮膠濃度在3O％_4O％之間對(duì)酯酶、過(guò)氧化物酶的電泳結(jié)果無(wú)影響，分離膠濃度在65％一lO％之間時(shí)，兩種酶的電泳結(jié)果有差異。酯酶同工酶最適分離膠濃度7

3、5％_85％，過(guò)氧化物酶同工酶的最適分離膠濃度在75％9O％之間。二者共同適用的分離膠濃度范是75％85％。(二)染色方法的比較結(jié)果不同染色方法對(duì)酯酶、過(guò)氧化物酶的染色效果各不相同。酯酶的最佳染色方法是試驗(yàn)處理中的方法三，其底色干擾小，操作簡(jiǎn)單，弱帶也能很好的顯現(xiàn)。過(guò)氧化物酶的最佳染色方法是N碼cI法，但此方法的缺點(diǎn)是配制成分很復(fù)雜，效果僅次于NH3cI法的是醋酸聯(lián)苯胺法，其最大缺點(diǎn)是底色干擾較大，但簡(jiǎn)便快捷。若適當(dāng)縮短染色時(shí)間可減少底