番石榴葉總?cè)聘纳铺悄虿〈笫笾車窠?jīng)病變的作用機(jī)制研究.pdf

1、目的：觀察番石榴葉總?cè)疲═TPGL）對(duì)糖尿病周圍神經(jīng)病變（DPN）大鼠的神經(jīng)功能及形態(tài)學(xué)變化、炎癥介質(zhì)表達(dá)，考察藥物改善DPN的作用，并通過(guò)觀察TTPGL對(duì)TNF-αmRNA、IL-6 mRNA、iNOS mRNA表達(dá)以及NF-κB路徑上多個(gè)蛋白表達(dá)的影響，探討TTPGL的作用機(jī)制。
　　方法：采用高脂飲食加腹腔注射STZ（35mg/kg）建立糖尿病大鼠模型。將糖尿病大鼠隨機(jī)分為5組：TTPGL低、中、高劑量組（30,60,12

2、0mg/kg/d）；模型組（DM）和羅格列酮（RSG,3mg/kg/d）對(duì)照組。另取正常大鼠9只，設(shè)為正常對(duì)照組（Control）。灌胃給藥8周之后，在體測(cè)定坐骨神經(jīng)運(yùn)動(dòng)傳導(dǎo)速度（MNCV）、感覺(jué)傳導(dǎo)速度（SNCV）以及大鼠熱痛閾值；體外對(duì)神經(jīng)組織進(jìn)行HE染色觀察病理學(xué)改變，熒光定量法分析組織炎癥介質(zhì)的含量；Real Time-PCR檢測(cè)坐骨神經(jīng)組織TNF-αmRNA、IL-6 mRNA和iNOS mRNA的表達(dá)量，Western Bl

3、ot檢測(cè)Akt、IKKα、p65及其磷酸化蛋白表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　1.TTPGL對(duì)糖尿病大鼠體重及血糖指標(biāo)的影響
　　實(shí)驗(yàn)第8周時(shí)，Control體重由254.5±14.8g增長(zhǎng)到490.6±11.0g（Mean±SD），空腹血糖穩(wěn)定在正常水平5.0-6.0mmol/L；與Control組比較，DM組糖尿病大鼠體重明顯減輕，血糖顯著升高(P≤0.01)，整個(gè)實(shí)驗(yàn)期間維持在高于15.0mmol/L的高血糖狀態(tài)。

4、>　　2.TTPGL對(duì)糖尿病大鼠坐骨神經(jīng)MNCV、SNCV及熱痛閾值的影響
　　與Control組比較，第8周時(shí)DM組大鼠坐骨神經(jīng)傳導(dǎo)速度（MNCV、SNCV）顯著性減慢（P≤0.01）；與DM組比較，TTPGL、RSG給藥組糖尿病大鼠的傳導(dǎo)速度顯著提高（P≤0.05）。
　　與Control組相比，DM組大鼠第4周時(shí)熱痛閾值無(wú)明顯變化。實(shí)驗(yàn)8周時(shí)，DM組大鼠熱痛閾值顯著升高（P≤0.01）。與DM組相比，TTPGL、RSG

5、等給藥組在第8周熱痛閾值均表現(xiàn)出顯著性降低，熱敏感度得到一定程度的恢復(fù)（P≤0.05）。
　　3.TTPGL對(duì)糖尿病大鼠坐骨神經(jīng)炎癥介質(zhì)表達(dá)的影響
　　與Control組比較，DM組TNF-αmRNA、IL-6 mRNA和iNOS mRNA炎癥介質(zhì)基因表達(dá)顯著增加，TNF-α、IL-6和iNOS含量升高（P≤0.01）；與DM組比較，TTPGL和RSG明顯降低炎癥介質(zhì)的基因表達(dá)和含量(P≤0.05或 P≤0.01)。

6、　　4.TTPGL對(duì)糖尿病大鼠坐骨神經(jīng)組織形態(tài)學(xué)的影響
　　Control組大鼠坐骨神經(jīng)排列有序，髓鞘清晰，組織間致密無(wú)水腫且無(wú)游離細(xì)胞產(chǎn)生；而DM組大鼠坐骨神經(jīng)結(jié)構(gòu)排列紊亂，髓鞘脫落，組織間水腫并游離細(xì)胞較多。與DM相比，TTPGL和RSG明顯減輕糖尿病大鼠神經(jīng)組織病理學(xué)變化，表現(xiàn)為隨劑量增加神經(jīng)結(jié)構(gòu)排列、組織細(xì)胞間的致密程度得到一定程度的改善。
　　5.TTPGL對(duì)糖尿病大鼠坐骨神經(jīng)NF-κB介導(dǎo)的信號(hào)通路蛋白的影響

7、r>　　與Control組比較，糖尿病模型組大鼠p-Akt/Akt、p-IKKα/IKKα、p-p65/p65含量顯著增加（P≤0.01)，提示糖尿病大鼠NF-κB介導(dǎo)的信號(hào)通路蛋白磷酸化活性增強(qiáng)。與模型組相比，TTPGL和RSG可顯著降低上述各蛋白磷酸化活性在糖尿病大鼠坐骨神經(jīng)組織中的表達(dá)（P≤0.05或P≤0.01）。
　　結(jié)論：本課題發(fā)現(xiàn) TTPGL具有明顯改善糖尿病周圍神經(jīng)病變的作用，其作用機(jī)制可能是通過(guò)下調(diào) NF-κB介