綠針假單胞菌XF10對(duì)煙草黑脛病菌的拮抗作用研究.pdf

1、由寄生疫霉煙草致病變種[Phytophthoraparasitica var.nicotianae(Breda de Haan)Tucker]引起的煙草黑脛病是煙草生產(chǎn)中危害極其嚴(yán)重的一類(lèi)根莖病。為了豐富煙草黑脛病拮抗細(xì)菌菌株資源，有效利用生物防治方法控制煙草黑脛病，在煙草黑脛病發(fā)病嚴(yán)重地塊的健株根際周?chē)x取土壤樣品300份，篩選獲得了對(duì)煙草黑脛病菌有明顯拮抗作用的生防菌株XF10，對(duì)該菌株進(jìn)行鑒定，并就其對(duì)煙草黑脛病菌的拮抗作用進(jìn)行研

2、究，主要研究如下:
　　1.將土壤樣品通過(guò)平板稀釋法、噴施病原指示菌初篩、平板對(duì)峙培養(yǎng)復(fù)篩等方法獲得了CY106、XF10、CY110三株對(duì)煙草黑脛病菌有明顯拮抗作用的細(xì)菌。其中XF10對(duì)煙草黑脛病菌的抑制率最高，為83％;盆栽試驗(yàn)結(jié)果顯示，XF10菌株對(duì)煙草黑脛病相對(duì)防治效果最好。通過(guò)不同菌種保存方法對(duì)XF10菌株抑菌活性的影響，確定最佳保存方法為-80℃甘油保存。
　　2.經(jīng)生理生化特性觀察、BIOLOG自動(dòng)微生物鑒定系

3、統(tǒng)、16S rDNA基因序列分析，結(jié)果確定XF10為假單孢菌屬綠針假單胞菌（Pseudomonas chlororaphis）。
　　3.通過(guò)研究培養(yǎng)時(shí)間、溫度、pH對(duì)XF10菌株的影響，探明XF10菌株最佳培養(yǎng)時(shí)間72h、最適生長(zhǎng)溫度為31℃、最適pH為7.5。
　　4.XF10菌株的菌懸液以及發(fā)酵上清液對(duì)煙草黑脛病菌的抑制率均達(dá)80％以上。XF10菌株能夠抑制煙草黑脛病菌菌絲正常生長(zhǎng)，進(jìn)一步分析結(jié)果表明，該菌株能夠產(chǎn)生纖

4、維素酶和蛋白酶。
　　5.XF10菌株菌懸液以及發(fā)酵上清液對(duì)煙草黑脛病菌菌量生長(zhǎng)、孢子囊產(chǎn)生、孢子囊釋放、游動(dòng)孢子萌發(fā)均能起到很好的抑制作用，其中作用最明顯的處理是加入5mL菌株菌懸液，對(duì)菌絲生長(zhǎng)量的抑制作用明顯;對(duì)孢子囊的產(chǎn)生抑制率達(dá)95.6％;孢子囊釋放最高相對(duì)抑制率達(dá)86.7％;對(duì)游動(dòng)孢子的萌發(fā)也具有一定的抑制作用，放置24h抑制率為58.2％。
　　6.通過(guò)平板對(duì)扣法測(cè)定XF10菌株揮發(fā)性產(chǎn)物對(duì)煙草黑脛病菌的抑制作用