球形脂聯(lián)素對2型糖尿病大鼠動脈粥樣硬化的影響及其機制探討.pdf

1、目的：
　　建立2型糖尿病（T2 DM）大鼠模型，觀察不同時間段（4、8、12周）胸主動脈組織中轉(zhuǎn)化生子因子β1（TGF-β1）、S mad3、S mad7、1型膠原蛋白（Co l-1）的表達情況；同時比較球形脂聯(lián)素（gAd）干預(yù)后4、8、12周大鼠胸主動脈組織中TGF-β1、Smad3、Smad7、Col-1與T2DM大鼠模型組的變化，探討gAd與TGF-β1/Smads信號通路之間的關(guān)系及其對T2DM大鼠動脈粥樣硬化（AS）保

2、護作用的機制，為臨床拓展防治T2DM大血管并發(fā)癥提供新思路。
　　方法：
　　90只雄性sprague-dawley（SD）大鼠隨機分為正常對照組（N組，n=24）和T2DM造模組(n=66），成模的53只再分為T2DM組（D組，n=26）、干預(yù)組（A組，n=27）。A組給予gAd10μg·kg-1·d-1腹腔推注，余兩組給予等量生理鹽水。各組分別于4、8、12周末隨機取8只大鼠麻醉后采血，測空腹血糖（FP G）、總膽固醇（

3、TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）；留取胸主動脈標(biāo)本，行HE染色后光鏡觀察其形態(tài)學(xué)改變，并用免疫組化法測C o l-1的表達，應(yīng)用蛋白免疫印跡（Western blotting）、實時熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）法測TGF-β1、Smad3、Smad7蛋白及其 mRNA的表達。據(jù)實驗結(jié)果及統(tǒng)計學(xué)處理分析，探討它們之間的關(guān)系。
　　結(jié)果：
　　1.各時間段中，D

4、組大鼠FPG、TC、TG、LDL-C明顯高于N組，而HDL-C降低；A組FPG、TC、TG、LDL-C均低于相應(yīng)D組，而HDL-C較之升高（P均＜0.05）。
　　2. HE染色顯示：N組大鼠動脈壁內(nèi)、中、外膜三層結(jié)構(gòu)完整，管壁光滑，內(nèi)膜及中層細(xì)胞排列規(guī)則。D組可見動脈壁內(nèi)、中、外膜界限不清、輕度紊亂，內(nèi)膜完整性破壞，內(nèi)皮細(xì)胞部分脫落，中膜平滑肌細(xì)胞形態(tài)多樣，數(shù)量增多，排列不規(guī)則；并且隨著 T2DM病程延長，上述病變呈時間依賴性加

5、重。gAd干預(yù)后，A組上述病變較相應(yīng)D組分別減輕，且隨著干預(yù)時間延長，胸主動脈AS程度呈時間依賴性減輕。
　　3.免疫組化、Western blotting和RT-PCR法顯示：D組TGF-β1、Smad3、Col-1的表達明顯多于N組，而Smad7表達減少（P均＜0.05）；A組TGF-β1、S mad3、Co l-1表達明顯低于同期D組，而S mad7表達增多。且隨著gAd干預(yù)時間延長，TGF-β1、Smad3、Col-1的表

6、達逐漸減少，Smad7表達逐漸增多（P＜0.05）。
　　結(jié)論：
　　1. T2DM模型組大鼠胸主動脈 TGF-β1、Smad3、Col-1表達水平明顯升高，而Smad7表達下降，并且隨著病程的延長，TGF-β1、S mad3、Co l-1水平依次升高，S mad7依次降低，與光鏡下胸主動脈AS程度一致，提示TGF-β1/S mads信號通路的異常表達可能參與了T2DM大鼠 AS的發(fā)生、發(fā)展。
　　2. gAd干預(yù)組大