2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:
   1.確認(rèn)正清風(fēng)痛寧和甲氨蝶呤單用及聯(lián)用對于RA骨破壞的抑制作用強度;
   2.從炎癥及RANKL系統(tǒng)解釋正清風(fēng)痛寧聯(lián)合甲氨蝶呤對抗骨破壞的可能機制。
   方法:
   1.酶消化法進行RA滑膜成纖維細(xì)胞原代培養(yǎng),本實驗采用5-10代滑膜成纖維細(xì)胞。分為4組并作以下處理:空白對照組,MTX組(濃度0.1mg/ml),正清風(fēng)痛寧組(濃度0.1mg/ml),聯(lián)合組(正清風(fēng)痛寧+MTX,各加濃度

2、0.1mg/ml)。采用蘇木精一伊紅染色比較不同藥物對滑膜成纖維樣細(xì)胞組織形態(tài)學(xué)的影響;流式細(xì)胞術(shù)檢測不同藥物對滑膜成纖維樣細(xì)胞凋亡的影響;RT-PCR測定RANKLmRNA的表達。
   2.建立Ⅱ型膠原蛋白誘導(dǎo)的SD大鼠關(guān)節(jié)炎模型,隨機分為模型組(生理鹽水灌胃)、MTX組(3.8mg/kg/w灌胃)、聯(lián)合組(正清風(fēng)痛寧+MTX組,正清風(fēng)痛寧130mg/kg/d和MTX3.8mg/kg/w灌胃),另設(shè)7只作為正常對照組。采用關(guān)

3、節(jié)評分法評估關(guān)節(jié)炎癥程度,并用ELISA法分析大鼠血清中OPG、RANKL、IL-1α、IL-6、MMP-3,MMP-13的表達水平。
   結(jié)果:
   1.加藥組對滑膜細(xì)胞組織形態(tài)學(xué)的改變,光鏡下見滑膜細(xì)胞出現(xiàn)凋亡表現(xiàn),形態(tài)異常;熒光顯微鏡下見滑膜細(xì)胞出現(xiàn)核質(zhì)濃集,有明顯的凋亡小體。
   2.加藥組對滑膜細(xì)胞增殖均有不同程度的抑制作用,流式細(xì)胞儀檢測結(jié)果顯示:空白對照組25.3%,MTX組28.4%,正清風(fēng)

4、痛寧組32.3%,聯(lián)合組34.7%,說明加藥組凋亡細(xì)胞百分率均明顯高于空白對照組。
   3.RT-PCR結(jié)果顯示:各組RANKL電泳條帶均較空白組弱;聯(lián)合組OPG電泳條帶較空白組強。相對灰度值計算結(jié)果顯示,聯(lián)合組與其余各組相比,其RANKL比值最小,OPG比值最大;MTX組與正清風(fēng)痛寧組之間比值相似。
   4.造模后,大鼠關(guān)節(jié)炎腫脹程度在第21d最為明顯,然后逐漸消退,在第35d左右會出現(xiàn)第2個炎癥高峰,MTX組和聯(lián)

5、合組均可減輕關(guān)節(jié)腫脹,關(guān)節(jié)炎指數(shù)評分在第46d與造模組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P≤0.05)。
   5.與模型組比較,MTX組和聯(lián)合組均可明顯抑制大鼠血清IL-1α、IL-6的表達水平,與MTX組相比聯(lián)合組血清IL-1α,IL-6的表達水平顯著降低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P≤0.05);MTX組和聯(lián)合組都可明顯抑制血清MMP-3和MMP-13的表達水平,同時聯(lián)合組血清MMP-3的表達水平低于MTX組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P≤0.05)

6、。
   6.與模型組比較,MTX組、聯(lián)合組均提高OPG的表達水平,升高OPG與RANKL的比值;聯(lián)合組可降低血清RANKL的表達水平,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P≤0.05);聯(lián)合組與MTX組比較,血清RANKL的表達水平下降更為明顯,OPG與RANKL的比值也有顯著上升,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P≤0.05)。
   結(jié)論:
   1.對體外培養(yǎng)的RA患者成纖維細(xì)胞研究發(fā)現(xiàn),正清風(fēng)痛寧與MTX聯(lián)合體外給藥能夠協(xié)同促進滑膜成

7、纖維細(xì)胞凋亡,并且對RANKL及OPGmRNA的表達有顯著影響,說明正清風(fēng)痛寧聯(lián)合MTX能夠促進滑膜成纖維細(xì)胞凋亡,并影響OPG-RANKL系統(tǒng)的平衡調(diào)節(jié)。
   2.對CIA大鼠誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎模型病變的研究發(fā)現(xiàn),正清風(fēng)痛寧與MTX聯(lián)合給藥對CIA大鼠關(guān)節(jié)腫脹有明顯的防治效應(yīng),能夠較好地控制炎癥發(fā)生發(fā)展,可能與其對血清IL-1α、IL-6等炎性因子的抑制作用有關(guān);正清風(fēng)痛寧與MTX可協(xié)同延緩骨破壞的發(fā)生,可能與其通過對MMP-3、

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