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文檔簡介
1、目的:觀察補(bǔ)陽還五湯對(duì)單側(cè)輸尿管梗阻大鼠腎臟間質(zhì)纖維化及氧化應(yīng)激的影響及并探討其機(jī)制。
方法:將60只雄性SD大鼠隨機(jī)分為正常組(Nor),假手術(shù)組(Sham),模型組(UUO),白藜蘆醇組(Res),補(bǔ)陽還五湯組(BYHW),地龍+黃芪組(D+H),每組10只。術(shù)前5d開始灌胃,白藜蘆醇組以20mg/kg·d灌胃,正常組、假手術(shù)組及模型組灌以等量生理鹽水,中藥組每日以相應(yīng)中藥灌胃。分別行單側(cè)輸尿管結(jié)扎術(shù),假手術(shù)組只進(jìn)行輸尿管
2、游離,術(shù)后連續(xù)灌胃3天、7天后每組處死5只,取手術(shù)側(cè)腎臟,HE,Masson染色觀察腎組織病理變化;免疫組織化學(xué)法檢測腎組織FN表達(dá);化學(xué)比色法檢測腎組織勻漿MDA含量,Western blot檢測腎臟SIRT1、SIRT2、SIRT3、SOD2、CAT及n-NRF2蛋白表達(dá)。
結(jié)果:
1.腎臟病理顯示:正常組及假手術(shù)組均無異常變化,模型組與假手術(shù)組相比,第3d,7d腎組織結(jié)構(gòu)均不清,見大量萎縮塌陷或擴(kuò)張小管,間質(zhì)炎
3、性細(xì)胞浸潤(P<0.001,P<0.001);與模型組相比,第3d,7d補(bǔ)陽還五湯組、地龍+黃芪組及白藜蘆醇組病理損傷程度改變均明顯減輕(P<0.001,P<0.001,P<0.001);
2.免疫組化顯示:正常組及假手術(shù)組腎小球及腎小管基膜上僅見少量棕黃色染色,在間質(zhì)中未見明顯染色,兩組無明顯差異;模型組腎小球、腎小管基膜均見大量棕黃色染色,腎小管間質(zhì)中亦可見大量棕黃色染色,較假手術(shù)FN表達(dá)均明顯增加(P<0.001,P<0
4、.001),三組用藥后均明顯減低(P<0.001,P<0.001,P<0.001);
3.腎組織勻漿MDA檢測發(fā)現(xiàn)第3d,7d模型組腎組織MDA含量同假手術(shù)組對(duì)照均顯著增高(P<0.001,P<0.001),與模型組相比,第3d,7d三組用藥后腎組織MDA含量均不同程度的降低(P<0.001,P<0.001,P<0.001);
4.Western blot結(jié)果發(fā)現(xiàn):
(1)模型組同假手術(shù)組對(duì)照 SOD2及
5、CAT表達(dá)均明顯降低(P<0.001, P<0.001),兩中藥組SOD2及CAT表達(dá)均明顯增高(P<0.001,P<0.001),白藜蘆醇組SOD2蛋白在術(shù)后3d,7d均不同程度增高(P<0.001,P<0.05),但CAT表達(dá)較模型組無明顯變化。
?。?)第3d,7d模型組較假手術(shù)組SIRI1,SIRT3蛋白表達(dá)均顯著降低(P<0.001,P<0.001),術(shù)后3d,7d三組用藥均能不同程度增加SIRT1,SIRT3蛋白表達(dá)
6、,其中SIRT1蛋白在術(shù)后3d時(shí)地龍+黃芪組增加更顯著(P<0.001),SIRT3蛋白在術(shù)后3d及7d時(shí),地龍+黃芪組表達(dá)增加更顯著(P<0.05);第3d,7d模型組較假手術(shù)組SIRI2蛋白表達(dá)均顯著增高(P<0.001,P<0.001),三個(gè)用藥組SIRT2表達(dá)均顯著降低(P<0.001,P<0.001,P<0.001);
?。?)術(shù)后3d及7d,相較模型組,地龍+黃芪組腎組織n-NRF2蛋白表達(dá)均明顯增高(P<0.001
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