中國明對蝦幼體對卵黃蛋白的利用研究.pdf

1、本實驗首次嘗試用選擇性沉淀法提純中國明對蝦的卵黃蛋白，并建立了EDTA-MgCl2提純卵黃蛋白的方法。利用層析法(SephadexG-150，DEAE-Cellulose-52)大量提純了中國明對蝦卵巢中的卵黃蛋白，采用常規(guī)免疫方法，以純化的卵黃蛋白作為抗原來免疫家兔，制備了卵黃蛋白的抗血清。并利用此抗血清進行對蝦雌性蛋白的免疫學研究，通過免疫擴散和免疫印跡反應檢測了抗血清的特異性。 利用卵黃蛋白抗血清的高特異性，建立了間接競爭

2、酶聯(lián)免疫吸附反應(ELISA)測定中國明對蝦卵黃蛋白的方法。并確立了測定參數(shù)：抗血清與包被抗原的最佳工作濃度分別為1：10000和125ng/mL卵黃蛋白；最適檢測范圍為10～500ng/mL；批內變異系數(shù)為5.0％，批間變異系數(shù)為6.2％。 采用ELISA方法測定了中國明對蝦卵及無節(jié)幼體時期卵黃蛋白含量的變化，卵黃蛋白含量一直呈減少的趨勢，N3～4至N5～6期和N5～6至Z1期兩個時期卵黃蛋白的消耗量最大，分別為1322ng/