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文檔簡介
1、目的:通過對隨機人群及不同年齡、不同性別體檢正常人群進行四種天然抗體(抗卵核抗體、抗卵清抗體、抗牛血清抗體和抗傷寒多糖抗體)水平檢測,研究其分布特點及與年齡性別的關系,并探索其與HLA-DQB1等位基因的關聯(lián)。以抗核抗體陽性病人作研究對象探討其臨床意義。
方法:
1.隨機選取大連機車醫(yī)院體檢正常人群86人(男36人、女50人,平均年齡28.52歲)。同批樣品在相同濃度卵核抗原包被酶標板上連續(xù)做5次,每天一次,
2、一次13個樣品;同一樣本在相同濃度卵核抗原包被酶標板上連續(xù)做16次,每天一次。分別測定各個樣品每次抗卵核抗體對數(shù)單位,分析基于酶聯(lián)免疫建立的測定抗卵核抗體方法的精密度和穩(wěn)定性。
2.從大連血液中心和大連醫(yī)科大學附屬二院體檢中心隨機挑選體檢正常人群,其中>70歲(老年)男18人、女19人,<40歲(青年)男33人、女41人。分為老年組與青年組及男性組與女性組。用新建立的方法檢測其他三種天然抗體,探討該方法是否適用于這三種抗體
3、的檢測。研究四種天然抗體在不同年齡、不同性別人群中的分布情況。
3.在正常健康體檢人群中隨機抽取86人(男36人、女50人,年齡28.52±12.84),對其靜脈采血于EDTA抗凝管,提取其DNA。用PCR技術進行HLA-DQB1等位基因的擴增,用新建立的方法檢測其四種天然抗體的抗體對數(shù)單位含量。探討四種天然抗體與HLA-DQB1等位基因的關聯(lián)。
4.選取抗核抗體陽性病人(大連醫(yī)科大學附屬一院檢驗科35人、附
4、屬二院檢驗科23人)作為疾病組,其中男12人、女46人,平均年齡41.93。在體檢正常人群中隨機挑選86人(男36人、女50人,平均年齡28.52)作為對照組。測定四種天然抗體的抗體對數(shù)單位含量方法同前,探究該抗體在抗核抗體陽性人群體內的分布特點及臨床意義。
結果:
1.同批樣品在相同濃度卵核抗原包被酶標板上連續(xù)做5次,CV(%)平均值是7.157,P=0.013<0.05。同一樣本在相同濃度卵核抗原包被酶標
5、板上連續(xù)做16次,所測得的16次抗體對數(shù)單位CV(%)為4.8。一般變異系數(shù)(CV)定為10%以內。
2.同一樣本在卵清抗原板、牛血清抗原板、傷寒多糖抗原板上連續(xù)做16次,每天一次,測定相應抗體對數(shù)單位,所測得的相應抗體對數(shù)單位CV(%)分別為7.2、8.6、5.2??孤押丝贵w(P<0.01)和抗傷寒多糖抗體(P<0.05)在不同年齡組差別有統(tǒng)計學意義,且在老年組中該抗體對數(shù)單位含量偏低;其余兩種抗體(P>0.05)在不同
6、年齡組無顯著性差異。這四種天然抗體在不同性別組均無顯著性差異(P>0.05)。
3.體檢正常人群中有無HLA-DQB1*02位點,其對應的抗牛血清抗體對數(shù)單位(P<0.01)和抗傷寒多糖抗體對數(shù)單位(P<0.05)均有顯著性差異,且都是HLA-DQB1*02位點陰性者,該抗體對數(shù)單位偏高;體內有無HLA-DQB1*06位點,其對應的抗牛血清抗體對數(shù)單位水平有顯著性差異(P<0.05),且HLA-DQB1*06位點陽性者,該
7、抗體單位水平偏高。HLA-DQB1*03、04、05位點與四種天然抗體的抗體對數(shù)單位高低均無關。
4.在對照組和疾病組抗牛血清抗體對數(shù)單位水平有顯著性差異(P<0.01),且抗核抗體陽性人群該抗體偏高。其它三種天然抗體在對照組和疾病組均無顯著性差異(P>0.05)。
結論:
1.基于酶聯(lián)免疫建立的檢測天然抗體方法較一般方法為好,精密度高、穩(wěn)定可靠,可被廣泛用于檢測體內天然抗體。
2
8、.體內抗卵核抗體和抗傷寒多糖抗體受年齡影響,其它兩種抗體未發(fā)現(xiàn)這種現(xiàn)象。這四種天然抗體水平均不受性別影響。
3.HLA-DQB1*02位點是抗牛血清抗體和抗傷寒多糖抗體的抑制基因,HLA-DQB1*06位點是抗牛血清抗體的促發(fā)基因。在這四種天然抗體等位基因HLA-DQB1*03、04、05位點未表現(xiàn)促發(fā)或抑制作用。
4.抗核抗體陽性人群中抗牛血清抗體對數(shù)單位水平偏高,提示抗牛血清抗體可作為抗核抗體陽性人群篩查
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