龍牙百合低溫解除休眠期間蛋白質(zhì)和核酸的變化.pdf

1、分類號(hào)：UDC：密級(jí)編號(hào)：庚w?！?。玨L學(xué)位論文指導(dǎo)教師：揚(yáng)拍云夔援直昌太堂生金型堂堂院申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：亟專業(yè)名稱：揎塑堂論文提交日期：至壁Q生量旦論文答辯日期：2Q壁生亙旦學(xué)位授予單位和日期：直昌盔堂2QQ互生互旦答辯委員會(huì)主席：評(píng)閱人：2006年5月日圣僉口l晝f趕=一蘊(yùn)蚴陋摘要本文以龍牙百合的試管鱗莖為材料，以同時(shí)期25。C常溫貯藏為對(duì)照，用分光光度法研究了5℃低溫貯藏過程中水溶性蛋白、總蛋白、DNA、RNA含量的動(dòng)態(tài)變化；用SDS

2、一聚丙烯酰胺凝膠電泳和IEF—SDS雙向電泳方法分析了蛋白組分的變化，用PD0uest軟件對(duì)雙向電泳圖譜進(jìn)行蛋白表達(dá)差異分析，用MALDI—TOF—MS肽質(zhì)量指紋譜分析方法鑒定了部分低溫貯藏過程中特異表達(dá)或差異表達(dá)的蛋白。探討了蛋白質(zhì)含量和組分以及核酸含量變化與休眠解除的關(guān)系，為百合休眠的研究向分子水平的深入提供參考。主要實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下：水溶性蛋白和非水溶性蛋白的變化基本上呈相反的趨勢(shì)。低溫貯藏過程中，隨著貯藏時(shí)間的推移，水溶性蛋白含量逐

3、漸上升，貯藏前30d內(nèi)緩慢上升，此后快速上升，60d時(shí)達(dá)到623mg／gFW，是整個(gè)貯藏過程中水溶性蛋白含量最高的時(shí)期，比貯藏前提高了109mg／gFW，上升幅度達(dá)2l’4％，此后一直保持此水平；非水溶性蛋白在前40d內(nèi)緩慢下降，40d時(shí)的含量為170rng，比貯藏前下降了06mg／gFW，下降幅度達(dá)到261％，此后緩慢回升，但含量還是要低于貯藏前。常溫貯藏過程中，蛋白質(zhì)的變化和低溫貯藏有相同的趨勢(shì)，但無論水溶性蛋白、非水溶性蛋白的變化

4、幅度都要比低溫貯藏過程的變化小。水溶性蛋白的上升幅度為74％，非水溶性蛋白的下降幅度為152％。百合試管鱗莖低分子量蛋白含量豐富，21kD和23kD兩個(gè)蛋白組分表達(dá)優(yōu)勢(shì)明顯，是其主要的蛋白組分。低溫處理20d后，97kD處蛋白表達(dá)量下降，40d后，17kD處蛋白表達(dá)量明顯提高。檢測(cè)到3類低溫貯藏過程中變化的蛋白(多肽)：I5個(gè)新多肽出現(xiàn)，分別為34kD／p140、17kD／p156、16kD／p154、16kD／p140和951d3／p

5、172。這些多肽一旦出現(xiàn)就不會(huì)隨低溫處理時(shí)間的推移(至少80d內(nèi))消失；II4個(gè)多肽表達(dá)豐度顯著降低，分別為24kD／p165、21kD／p140、16kD／p14_8和22kD／p156；III11個(gè)多肽表達(dá)豐度顯著升高，分別為15kD／p146、15kO／p150、16kD／p140、17kD／p148、17kD／p158、35kD／p138、35kD／p146、38kD／p164、48l【D／p167、66kD／p164以及90k