不同亞型人隱孢子蟲和微小隱孢子蟲生物學特性研究.pdf

1、目前國內(nèi)少有的一些研究表明入主要感染人隱孢子蟲（Cryptosporidium hominis），但C．hominis群體遺傳結(jié)構(gòu)尚不清楚，從而不能推斷人隱孢子蟲病的感染來源和傳播機制。本課題對開封地區(qū)人源隱孢子蟲分離株以基于SSU rRNA基因的PCR-RFLP方法為主要工具進行種類和基因型鑒定、以GP60基因位點進行亞型分析，從而解析C．hominis群體遺傳結(jié)構(gòu)，初步總結(jié)出入隱孢子蟲病的流行規(guī)律和傳播機制。并用C． hominis

2、不同亞型分離株感染蒙古沙鼠、新生仔豬和羔羊，觀察其臨床癥狀和病理變化，從而研究不同亞型之間的生物學差異。同時對國內(nèi)主要C．hominis和微小隱孢子蟲(C. parvum)基因亞型進行致病性研究，了解國內(nèi)醫(yī)學上主要隱孢子蟲種生物學特性，以期為隱孢子蟲公共衛(wèi)生安全屏障的建立起到有效推動作用。
　　 開封是國家精品旅游城市，以其獨特的旅游資源和深厚的旅游文化，每年接納數(shù)億海內(nèi)外游客，人員流動性大，有利于機會性人獸共患寄生蟲傳播流行。

3、為了解開封地區(qū)臨床病人隱孢子蟲感染狀況，用飽和蔗糖溶液漂浮法、甲醛-乙酸乙酯-改良抗酸染色法對該地區(qū)門診和住院病人6093份糞便樣品進行了檢查。結(jié)果檢出隱孢子蟲感染率為0.1％，秋季為感染高峰期，6歲以下兒童感染率較高。所有分離株均為C． hominis，．Ib亞型家族占5/6，Ia亞型家族1/6。研究表明開封地區(qū)臨床病人隱孢子蟲感染率較低，但仍應(yīng)進一步開展健康教育，普及衛(wèi)生知識，提高自我保健意識和自我保健能力，預(yù)防食源性寄生蟲病的發(fā)生

4、和流行。
　　 目前國內(nèi)一些研究表明入主要感染人隱孢子蟲(Cryptosporidium hominis)，但已獲取且傳代保存的國內(nèi)C． hominis分離株較少，C．hominis生物學特性研究未見報道。在本試驗自感染前第10d起，采用胃導管灌服地塞米松抑制蒙古沙鼠(Meiiones Unguiculataus)免疫力直至排卵囊結(jié)束后14d，對國內(nèi)C．hominis Ib亞型分離株進行生物學特性研究。結(jié)果顯示，感染后3d，感染

5、組有卵囊排出，感染后第6d出現(xiàn)高峰期，此后還漸下降直至感染后10或11d排卵囊結(jié)束。感染前后基于18S rRNA和gp60基因分析，表明遺傳學無差異。建立了持續(xù)穩(wěn)定的C． hominis Ib亞型分離株嚙齒動物模型，為C．hominis卵囊擴增和進一步研究其生物學特性等提供了重要的參考依據(jù)。
　　 為了尋求更為經(jīng)濟有效的C． parvum卵囊保種傳代方法，將19日齡蒙古沙鼠隨機分成5組，免疫抑制對照組和感染組采用胃導管灌服地塞米

6、松0.80mg．只-1·2d-1，10d后，感染組沙鼠灌胃接種C． parvum卵囊，對排卵囊規(guī)律，臨床表現(xiàn)及組織學和超微結(jié)構(gòu)進行了觀察。結(jié)果感染后第2d有卵囊排除，顯露期OPG值近似于犢牛實驗，且持續(xù)時間較犢牛感染長，為C． parvum卵囊保種傳代提供了更為經(jīng)濟的實驗方法。
　　 為了初步確定人隱孢子蟲同一亞型家族內(nèi)不同亞型是否存在生物學表型差異，用分離自開封地區(qū)某醫(yī)院的C． hominis分離株ZZH-1(IbA20G2)

7、和WJH-35(IbA19G2)感染新斷奶蒙古沙鼠，3日齡羔羊和仔豬；通過比較感染后動物的臨床癥狀、蟲體寄生部位、寄生量和病理變化并測定感染動物的排卵囊規(guī)律、體重變化等一系列指標來初步確證不同亞型人隱孢子蟲致病性差異。研究結(jié)果顯示，不同亞型人隱孢子蟲的致病作用存在一定差異，為下一步隱孢子蟲毒理的深入研究奠定了理論基礎(chǔ)。
　　 為了研究人隱孢子蟲（Cryptosporidium hominis IbA19G2）和微小隱孢子蟲(C.