吸煙冠心病患者HDL對(duì)THP細(xì)胞膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)的影響及機(jī)制.pdf

1、目的：通過(guò)提取正常健康人及吸煙冠心病患者的HDL培養(yǎng)THP-1細(xì)胞源性泡沫細(xì)胞，觀察吸煙冠心病患者的HDL對(duì)其膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)的影響及機(jī)制，為吸煙促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)病機(jī)制提供理論基礎(chǔ)。
　　方法：采集正常健康人群及吸煙冠心病人群血樣，利用超高速離心機(jī)提取高密度脂蛋白（HDL）；利用佛波酯誘導(dǎo)THP-1細(xì)胞成為巨噬細(xì)胞，然后利用氧化低密度脂蛋白(ox-LDL）誘導(dǎo)上述細(xì)胞形成泡沫細(xì)胞，并將其分為3組，分別為：空白對(duì)照組、正常人HDL組、

2、吸煙冠心病HDL組。利用油紅O染色觀察分組泡沫細(xì)胞內(nèi)脂滴情況；利用液體閃爍計(jì)數(shù)儀從表觀現(xiàn)象方面檢測(cè)各組細(xì)胞相應(yīng)的膽固醇流出率；采用Western blot檢測(cè)以上3組三磷酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體A1（ABCA1）、三磷酸腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)體G1（ABCG1）、B類Ⅰ型清道夫受體（SR-BI）相應(yīng)蛋白質(zhì)含量。
　　結(jié)果：⑴成功提取人HDL，并鑒定；⑵佛波酯成功誘導(dǎo)THP-1細(xì)胞形成泡沫細(xì)胞， ox-LDL成功誘導(dǎo)泡沫細(xì)胞形成；⑶和空白對(duì)照組相比

3、，正常人HDL及吸煙冠心病HDL組均可使膽固醇流出率增加（P<0.05），正常人HDL組作用較吸煙冠心病HDL組作用顯著（P<0.05）；⑷與空白對(duì)照組相比，正常人HDL組ABCA1、ABCG1蛋白表達(dá)無(wú)明顯變化，吸煙冠心病HDL組ABCA1、ABCG1蛋白表達(dá)顯著減少（P<0.05）；⑸與空白對(duì)照組相比，正常人HDL組及吸煙冠心病HDL組SR-B1蛋白表達(dá)顯著升高，正常人HDL組作用較吸煙冠心病HDL組作用顯著（P<0.05）。